CAJ | 학술논문

目的:观察流体力学尾静脉注射对绿色荧光蛋白基因器官靶向性的影响,为今后质粒载体的基因治疗和功能研究寻找潜在的靶器官.方法:实验于2005-12/2006-04在江西省分子医学重点实验室完成.选用健康雄性昆明鼠40只,将32只小鼠按随机数字表法分为流体力学注射和常规注射两大组,每大组再分为转染组和对照组两个小组(n=8),并设正常对照组(n=8).①流体力学转染组将100 μg/只绿色荧光蛋白表达质粒溶液2 mL在5 s内快速注入尾静脉;对照组仅在5 s内注入林格氏液2 mL.②常规注射组则将2 mL林格氏液或绿色荧光蛋白表达质粒溶液在30 s左右注入尾静脉.注射结束后24 h采集各组小鼠血清检测转氨酶,并采集肝、脾、心、肾、肺和脑组织进行冰冻切片,部分肝组织采用多聚甲醛固定后切片,荧光显微镜下观察.结果:40只小鼠全部进入结果分析,无脱失.①流体力学注射组和常规注射组小鼠血清转氨酶与正常对照组比较差异均无显著性意义(P＞0.05).②常规尾静脉注射引起少数肾小球细胞表达绿色荧光蛋白,而肝、脾、心、肺及脑等组织未见明显绿色荧光蛋白表达.③流体力学注射引起肝内绿色荧光蛋白高水平表达,肝细胞表达率接近45%,其他组织则无绿色荧光蛋白表达.结论:流体力学方法是肝靶向性的活体基因转染方法,绿色荧光蛋白可作为该方法进行目的基因研究的一个可靠和方便的示踪剂.
목적:관찰류체역학미정맥주사대록색형광단백기인기관파향성적영향,위금후질립재체적기인치료화공능연구심조잠재적파기관.방법:실험우2005-12/2006-04재강서성분자의학중점실험실완성.선용건강웅성곤명서40지,장32지소서안수궤수자표법분위류체역학주사화상규주사량대조,매대조재분위전염조화대조조량개소조(n=8),병설정상대조조(n=8).①류체역학전염조장100 μg/지록색형광단백표체질립용액2 mL재5 s내쾌속주입미정맥;대조조부재5 s내주입림격씨액2 mL.②상규주사조칙장2 mL림격씨액혹록색형광단백표체질립용액재30 s좌우주입미정맥.주사결속후24 h채집각조소서혈청검측전안매,병채집간、비、심、신、폐화뇌조직진행빙동절편,부분간조직채용다취갑철고정후절편,형광현미경하관찰.결과:40지소서전부진입결과분석,무탈실.①류체역학주사조화상규주사조소서혈청전안매여정상대조조비교차이균무현저성의의(P＞0.05).②상규미정맥주사인기소수신소구세포표체록색형광단백,이간、비、심、폐급뇌등조직미견명현록색형광단백표체.③류체역학주사인기간내록색형광단백고수평표체,간세포표체솔접근45%,기타조직칙무록색형광단백표체.결론:류체역학방법시간파향성적활체기인전염방법,록색형광단백가작위해방법진행목적기인연구적일개가고화방편적시종제.