CAJ | 학술논문

目的:构建含小鼠GITRL基因的真核表达质粒pIRES2-eGFP/mGITRL,体外转染小鼠肺癌细胞株Lewis细胞.方法:利用PCR方法扩增mGITRL基因,克隆至pIRES2-eGFP载体,选择阳性克隆并进行序列测定.以电穿孔法转染Lewis细胞,通过G418筛选,获得稳定表达细胞株.结果:构建了真核表达质粒pIRES2-eGFP/mGITRL,基因测序与GenBank中发表的序列完全一致,体外转染Lewis细胞,经G418筛选,体外传代30代以上,RT-PCR及流式细胞仪检测该细胞株稳定表达mGITRL.结论:成功构建了真核表达质粒pIRES2-eGFP/mGITRL,并在小鼠Lewis细胞中稳定表达,为进一步研究GITRL的生物学功能提供研究基础.
목적:구건함소서GITRL기인적진핵표체질립pIRES2-eGFP/mGITRL,체외전염소서폐암세포주Lewis세포.방법:이용PCR방법확증mGITRL기인,극륭지pIRES2-eGFP재체,선택양성극륭병진행서렬측정.이전천공법전염Lewis세포,통과G418사선,획득은정표체세포주.결과:구건료진핵표체질립pIRES2-eGFP/mGITRL,기인측서여GenBank중발표적서렬완전일치,체외전염Lewis세포,경G418사선,체외전대30대이상,RT-PCR급류식세포의검측해세포주은정표체mGITRL.결론:성공구건료진핵표체질립pIRES2-eGFP/mGITRL,병재소서Lewis세포중은정표체,위진일보연구GITRL적생물학공능제공연구기출.