第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2008年
9期
878-879
,共2页
白洁%陈庆%赵伟%刘进洲%薛建%刘雅诚
白潔%陳慶%趙偉%劉進洲%薛建%劉雅誠
백길%진경%조위%류진주%설건%류아성
免疫荧光%4-甲基磷酸伞型酮%磁珠%C肽
免疫熒光%4-甲基燐痠傘型酮%磁珠%C肽
면역형광%4-갑기린산산형동%자주%C태
目的 建立一种低成本、高敏感性检测人血清C肽(C-Peptide,C-P)的磁分离免疫荧光方法(magnetic separa-tion enzyme immunofluorescence,MEIF).方法 用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)标记的抗C肽特异性单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),与异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)偶联的另1个抗C肽mAb配对构成双抗体夹心免疫结合,用抗FITC的多抗免疫磁珠作为固相分离载体,用4-甲基磷酸伞型酮(4-methylumbelliferyl-phosphoricacid,4-MUP)为荧光底物建立磁分离酶联免疫荧光分析法.结果 方法灵敏度0.033 ng/ml,批内变异系数(CV)为4.4%-5.9%,批间CV为4.3%-8.6%,稀释回收率为82.4%-119.4%,加标回收率为94.1%-113.0%.将实际样品测定与磁分离免疫发光系统检测的结果相比较有较好的相关性.结论 MEIF定量测定C肽的方法成本低、灵敏度及特异性高、稳定性好,具有较好的应用前景.
目的 建立一種低成本、高敏感性檢測人血清C肽(C-Peptide,C-P)的磁分離免疫熒光方法(magnetic separa-tion enzyme immunofluorescence,MEIF).方法 用堿性燐痠酶(alkaline phosphatase,AP)標記的抗C肽特異性單剋隆抗體(monoclonal antibody,mAb),與異硫氰痠熒光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)偶聯的另1箇抗C肽mAb配對構成雙抗體夾心免疫結閤,用抗FITC的多抗免疫磁珠作為固相分離載體,用4-甲基燐痠傘型酮(4-methylumbelliferyl-phosphoricacid,4-MUP)為熒光底物建立磁分離酶聯免疫熒光分析法.結果 方法靈敏度0.033 ng/ml,批內變異繫數(CV)為4.4%-5.9%,批間CV為4.3%-8.6%,稀釋迴收率為82.4%-119.4%,加標迴收率為94.1%-113.0%.將實際樣品測定與磁分離免疫髮光繫統檢測的結果相比較有較好的相關性.結論 MEIF定量測定C肽的方法成本低、靈敏度及特異性高、穩定性好,具有較好的應用前景.
목적 건립일충저성본、고민감성검측인혈청C태(C-Peptide,C-P)적자분리면역형광방법(magnetic separa-tion enzyme immunofluorescence,MEIF).방법 용감성린산매(alkaline phosphatase,AP)표기적항C태특이성단극륭항체(monoclonal antibody,mAb),여이류청산형광소(fluorescein isothiocyanate,FITC)우련적령1개항C태mAb배대구성쌍항체협심면역결합,용항FITC적다항면역자주작위고상분리재체,용4-갑기린산산형동(4-methylumbelliferyl-phosphoricacid,4-MUP)위형광저물건립자분리매련면역형광분석법.결과 방법령민도0.033 ng/ml,비내변이계수(CV)위4.4%-5.9%,비간CV위4.3%-8.6%,희석회수솔위82.4%-119.4%,가표회수솔위94.1%-113.0%.장실제양품측정여자분리면역발광계통검측적결과상비교유교호적상관성.결론 MEIF정량측정C태적방법성본저、령민도급특이성고、은정성호,구유교호적응용전경.
