浙江中西医结合杂志
浙江中西醫結閤雜誌
절강중서의결합잡지
ZHEJIANG JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL CHINESE AND WESTERN MEDICINE
2009年
12期
740-742,封3
,共4页
外周血%树突状细胞%体外培养%鉴%定
外週血%樹突狀細胞%體外培養%鑒%定
외주혈%수돌상세포%체외배양%감%정
目的:建立体外从健康成人外周血单核细胞(Mo)诱导培养成熟的树突状细胞(DC)的方法.方法:采用连续贴壁法分离正常人外周血单核细胞,在GM-CSF和IL-4的完全培养基中培养.培养5天后收集细胞,重新铺板后继续在TNF-α的完全培养基中培养48小时后,收集细胞和上清液,采用流式细胞术检测DC表型 CD80、CD83、CD40的表达;用ELISA法检测上清液中细胞因子IL-12的浓度;用倒置显微镜动态观察DC形态变化.结果:采用连续贴壁法和用GM-CSF、IL-4 和 TNF-α联合培养可以从人外周血诱导培养出大量的树突状细胞,且高表达CD80、 CD83、CD40,表达率分别为84.29%、90.73%、92.38%.DC分泌的细胞因子IL-12浓度为38.52±11.34pg/ml.结论:采用连续贴壁法和用GM-CSF、IL-4 和 TNF-α联合培养可以从人外周血诱导培养大量的树突状细胞,检测表型CD80、CD83、CD40的表达率和细胞因子IL-12浓度可以鉴定树突状细胞.
目的:建立體外從健康成人外週血單覈細胞(Mo)誘導培養成熟的樹突狀細胞(DC)的方法.方法:採用連續貼壁法分離正常人外週血單覈細胞,在GM-CSF和IL-4的完全培養基中培養.培養5天後收集細胞,重新鋪闆後繼續在TNF-α的完全培養基中培養48小時後,收集細胞和上清液,採用流式細胞術檢測DC錶型 CD80、CD83、CD40的錶達;用ELISA法檢測上清液中細胞因子IL-12的濃度;用倒置顯微鏡動態觀察DC形態變化.結果:採用連續貼壁法和用GM-CSF、IL-4 和 TNF-α聯閤培養可以從人外週血誘導培養齣大量的樹突狀細胞,且高錶達CD80、 CD83、CD40,錶達率分彆為84.29%、90.73%、92.38%.DC分泌的細胞因子IL-12濃度為38.52±11.34pg/ml.結論:採用連續貼壁法和用GM-CSF、IL-4 和 TNF-α聯閤培養可以從人外週血誘導培養大量的樹突狀細胞,檢測錶型CD80、CD83、CD40的錶達率和細胞因子IL-12濃度可以鑒定樹突狀細胞.
목적:건입체외종건강성인외주혈단핵세포(Mo)유도배양성숙적수돌상세포(DC)적방법.방법:채용련속첩벽법분리정상인외주혈단핵세포,재GM-CSF화IL-4적완전배양기중배양.배양5천후수집세포,중신포판후계속재TNF-α적완전배양기중배양48소시후,수집세포화상청액,채용류식세포술검측DC표형 CD80、CD83、CD40적표체;용ELISA법검측상청액중세포인자IL-12적농도;용도치현미경동태관찰DC형태변화.결과:채용련속첩벽법화용GM-CSF、IL-4 화 TNF-α연합배양가이종인외주혈유도배양출대량적수돌상세포,차고표체CD80、 CD83、CD40,표체솔분별위84.29%、90.73%、92.38%.DC분비적세포인자IL-12농도위38.52±11.34pg/ml.결론:채용련속첩벽법화용GM-CSF、IL-4 화 TNF-α연합배양가이종인외주혈유도배양대량적수돌상세포,검측표형CD80、CD83、CD40적표체솔화세포인자IL-12농도가이감정수돌상세포.
