狂犬病病毒糖蛋白胞外区基因的原核表达、纯化及鉴定
광견병병독당단백포외구기인적원핵표체、순화급감정
Prokaryotic Expression,Purification and Identification of Rabies Virus Glycoprotein Extracellular Domain Gene
  • 万方数据
    华北农学报 화북농학보
    ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
    2010年 3期 28-31 ,共4页

    杨艳艳%王丽%杨继飞%郅玉宝%滕蔓%邓瑞广%肖治军%张改平

    양염염%왕려%양계비%질옥보%등만%산서엄%초치군%장개평

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    利用RT-PCR技术,将狂犬病病毒株ERA株糖蛋白胞外区基因分两段进行扩增,经克隆与序列分析,两片段大小分别为523,381 bp,各编码174,127个氨基酸,分子量分别为19.7,14.5 kDa.在原核表达载体pET-43a中分别克隆了这两段糖蛋白基因,将重组质粒转化到表达菌BL21(DE3)中,经SDS-PAGE电泳分析,在分子量约为94,89 kDa处分别出现新蛋白带,和预期的目的蛋白的分子量相符.两重组蛋白主要以可溶形式表达,利用Ni2+亲和层析柱纯化了蛋白,纯度大于95%. Western-Blot分析结果显示,两种重组融合蛋白均可与兔抗RBV多抗血清反应,具有良好的反应原性.
    이용RT-PCR기술,장광견병병독주ERA주당단백포외구기인분량단진행확증,경극륭여서렬분석,량편단대소분별위523,381 bp,각편마174,127개안기산,분자량분별위19.7,14.5 kDa.재원핵표체재체pET-43a중분별극륭료저량단당단백기인,장중조질립전화도표체균BL21(DE3)중,경SDS-PAGE전영분석,재분자량약위94,89 kDa처분별출현신단백대,화예기적목적단백적분자량상부.량중조단백주요이가용형식표체,이용Ni2+친화층석주순화료단백,순도대우95%. Western-Blot분석결과현시,량충중조융합단백균가여토항RBV다항혈청반응,구유량호적반응원성.
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