时珍国医国药
時珍國醫國藥
시진국의국약
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH
2012年
2期
340-343
,共4页
钱晓伟%潘丹岷%谭湘陵%张爱国%蔡建平
錢曉偉%潘丹岷%譚湘陵%張愛國%蔡建平
전효위%반단민%담상릉%장애국%채건평
骨髓间充质干细胞%成软骨分化%Ⅱ型胶原α1%软骨聚糖蛋白%中药
骨髓間充質榦細胞%成軟骨分化%Ⅱ型膠原α1%軟骨聚糖蛋白%中藥
골수간충질간세포%성연골분화%Ⅱ형효원α1%연골취당단백%중약
目的 观察中药雪莲花、丹参、仙灵脾、黄芪和复方右归饮含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(bMSCs)成软骨分化中Ⅱ型胶原α1 (Col2a1)和软骨聚糖蛋白(Acan)表达的影响.方法 2月龄SD大鼠分离骨髓间充质干细胞,置含15％胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基中培养.传至第3代后,将培养细胞分为未诱导组、TGF诱导组、中药血清诱导组和TGF -中药血清联合诱导组.中药血清的使用浓度为5％,由上述中药连续大鼠灌胃3d后,分离外周血获得.各组细胞诱导至7d和14 d时,分别提取总RNA,逆转录成cDNA,荧光定量PCR法检测Col2a1和Acan的表达,同时应用细胞免疫化学法检测诱导14 d的Ⅱ型胶原的表达.结果 bMSCs在TGF -β1的诱导下可以分化为软骨样细胞,在诱导后7d和14 d,TGF诱导组Col2a1的表达量显著高于未诱导组,分别为14.272倍和35.833倍,中药血清组Col2a1的表达量变化不显著,TGF -中药血清联合诱导组Col2a1的表达量虽高于未诱导组,但显著低于TGF诱导组.Acan基因的表达量在各组中均显著低于未诱导组.结论 骨髓间充质干细胞在体外可以分化为软骨样细胞,中药对细胞成软骨分化没有明显的促进作用,并对TGF诱导效应具有一定的抑制作用.
目的 觀察中藥雪蓮花、丹參、仙靈脾、黃芪和複方右歸飲含藥血清對大鼠骨髓間充質榦細胞(bMSCs)成軟骨分化中Ⅱ型膠原α1 (Col2a1)和軟骨聚糖蛋白(Acan)錶達的影響.方法 2月齡SD大鼠分離骨髓間充質榦細胞,置含15％胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培養基中培養.傳至第3代後,將培養細胞分為未誘導組、TGF誘導組、中藥血清誘導組和TGF -中藥血清聯閤誘導組.中藥血清的使用濃度為5％,由上述中藥連續大鼠灌胃3d後,分離外週血穫得.各組細胞誘導至7d和14 d時,分彆提取總RNA,逆轉錄成cDNA,熒光定量PCR法檢測Col2a1和Acan的錶達,同時應用細胞免疫化學法檢測誘導14 d的Ⅱ型膠原的錶達.結果 bMSCs在TGF -β1的誘導下可以分化為軟骨樣細胞,在誘導後7d和14 d,TGF誘導組Col2a1的錶達量顯著高于未誘導組,分彆為14.272倍和35.833倍,中藥血清組Col2a1的錶達量變化不顯著,TGF -中藥血清聯閤誘導組Col2a1的錶達量雖高于未誘導組,但顯著低于TGF誘導組.Acan基因的錶達量在各組中均顯著低于未誘導組.結論 骨髓間充質榦細胞在體外可以分化為軟骨樣細胞,中藥對細胞成軟骨分化沒有明顯的促進作用,併對TGF誘導效應具有一定的抑製作用.
목적 관찰중약설연화、단삼、선령비、황기화복방우귀음함약혈청대대서골수간충질간세포(bMSCs)성연골분화중Ⅱ형효원α1 (Col2a1)화연골취당단백(Acan)표체적영향.방법 2월령SD대서분리골수간충질간세포,치함15％태우혈청적DMEM/F12(1∶1)배양기중배양.전지제3대후,장배양세포분위미유도조、TGF유도조、중약혈청유도조화TGF -중약혈청연합유도조.중약혈청적사용농도위5％,유상술중약련속대서관위3d후,분리외주혈획득.각조세포유도지7d화14 d시,분별제취총RNA,역전록성cDNA,형광정량PCR법검측Col2a1화Acan적표체,동시응용세포면역화학법검측유도14 d적Ⅱ형효원적표체.결과 bMSCs재TGF -β1적유도하가이분화위연골양세포,재유도후7d화14 d,TGF유도조Col2a1적표체량현저고우미유도조,분별위14.272배화35.833배,중약혈청조Col2a1적표체량변화불현저,TGF -중약혈청연합유도조Col2a1적표체량수고우미유도조,단현저저우TGF유도조.Acan기인적표체량재각조중균현저저우미유도조.결론 골수간충질간세포재체외가이분화위연골양세포,중약대세포성연골분화몰유명현적촉진작용,병대TGF유도효응구유일정적억제작용.
