南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2004年
4期
89-92
,共4页
芮荣%邱妍%胡元亮%范必勤
芮榮%邱妍%鬍元亮%範必勤
예영%구연%호원량%범필근
猪%胚胎生殖细胞%增强型绿色荧光蛋白%转染
豬%胚胎生殖細胞%增彊型綠色熒光蛋白%轉染
저%배태생식세포%증강형록색형광단백%전염
以质粒DNA为增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的载体,对处于快速增殖期的8株猪胚胎生殖(EG)细胞(4～9代)进行转基因试验.用1 μg DNA 和2 μL LipofecTamine 2000转染EG细胞后,共获得4株转染EGFP基因的EG细胞系(EG-EGFP),可发出强绿色荧光;EG-EGFP细胞连续培养2周以上可分化为多种细胞类型.显微注射EG-EGFP细胞至卵裂期胚胎、桑椹胚卵周隙内或囊胚腔中,共注射135枚胚胎,其中112枚存活并发育至囊胚(83.0%);86枚嵌合体胚培养后含有荧光细胞,其中57枚囊胚在内细胞团(ICM)上发现有EG-EGFP细胞.
以質粒DNA為增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)的載體,對處于快速增殖期的8株豬胚胎生殖(EG)細胞(4～9代)進行轉基因試驗.用1 μg DNA 和2 μL LipofecTamine 2000轉染EG細胞後,共穫得4株轉染EGFP基因的EG細胞繫(EG-EGFP),可髮齣彊綠色熒光;EG-EGFP細胞連續培養2週以上可分化為多種細胞類型.顯微註射EG-EGFP細胞至卵裂期胚胎、桑椹胚卵週隙內或囊胚腔中,共註射135枚胚胎,其中112枚存活併髮育至囊胚(83.0%);86枚嵌閤體胚培養後含有熒光細胞,其中57枚囊胚在內細胞糰(ICM)上髮現有EG-EGFP細胞.
이질립DNA위증강형록색형광단백(EGFP)적재체,대처우쾌속증식기적8주저배태생식(EG)세포(4～9대)진행전기인시험.용1 μg DNA 화2 μL LipofecTamine 2000전염EG세포후,공획득4주전염EGFP기인적EG세포계(EG-EGFP),가발출강록색형광;EG-EGFP세포련속배양2주이상가분화위다충세포류형.현미주사EG-EGFP세포지란렬기배태、상심배란주극내혹낭배강중,공주사135매배태,기중112매존활병발육지낭배(83.0%);86매감합체배배양후함유형광세포,기중57매낭배재내세포단(ICM)상발현유EG-EGFP세포.
