中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2004年
5期
73-77
,共5页
张俊芳%韩兵社%解军%胡晓年%牛勃%程牛亮
張俊芳%韓兵社%解軍%鬍曉年%牛勃%程牛亮
장준방%한병사%해군%호효년%우발%정우량
人血小板因子4%大肠杆菌%包涵体%3'-非翻译区%血管生成抑制
人血小闆因子4%大腸桿菌%包涵體%3'-非翻譯區%血管生成抑製
인혈소판인자4%대장간균%포함체%3'-비번역구%혈관생성억제
为了提高人血小板因子4(human platelet factor 4,hPF4)的表达,在PT7-7-hPF4表达质粒的基础上,采用PCR定位突变技术,改造人血小板因子4(hPF4)cDNA基因片段,去除cDNA 3'端非翻译区AT富含序列,改用大肠杆菌强串联终止密码子TAATAA,成功构建了高效表达质粒pBV220-hPF4.摇瓶发酵重组人血小板因子4的产量达160mg/L较原表达质粒PT7-7-hPF4表达量提高了近80倍.经包涵体的洗涤、变性、复性后,采用鸡胚绒毛尿囊膜血管生成抑制实验测定复性后rhPF4的生物学活性,结果显示:rhPF4具有抑制血管生成活性.
為瞭提高人血小闆因子4(human platelet factor 4,hPF4)的錶達,在PT7-7-hPF4錶達質粒的基礎上,採用PCR定位突變技術,改造人血小闆因子4(hPF4)cDNA基因片段,去除cDNA 3'耑非翻譯區AT富含序列,改用大腸桿菌彊串聯終止密碼子TAATAA,成功構建瞭高效錶達質粒pBV220-hPF4.搖瓶髮酵重組人血小闆因子4的產量達160mg/L較原錶達質粒PT7-7-hPF4錶達量提高瞭近80倍.經包涵體的洗滌、變性、複性後,採用鷄胚絨毛尿囊膜血管生成抑製實驗測定複性後rhPF4的生物學活性,結果顯示:rhPF4具有抑製血管生成活性.
위료제고인혈소판인자4(human platelet factor 4,hPF4)적표체,재PT7-7-hPF4표체질립적기출상,채용PCR정위돌변기술,개조인혈소판인자4(hPF4)cDNA기인편단,거제cDNA 3'단비번역구AT부함서렬,개용대장간균강천련종지밀마자TAATAA,성공구건료고효표체질립pBV220-hPF4.요병발효중조인혈소판인자4적산량체160mg/L교원표체질립PT7-7-hPF4표체량제고료근80배.경포함체적세조、변성、복성후,채용계배융모뇨낭막혈관생성억제실험측정복성후rhPF4적생물학활성,결과현시:rhPF4구유억제혈관생성활성.
