中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2008年
3期
314-318
,共5页
邱昌伟%邓干臻%李成叶%林德贵
邱昌偉%鄧榦臻%李成葉%林德貴
구창위%산간진%리성협%림덕귀
VEGF%乳腺肿瘤%实时荧光定量PCR%犬
VEGF%乳腺腫瘤%實時熒光定量PCR%犬
VEGF%유선종류%실시형광정량PCR%견
为了准确地分析血管内皮生长因于(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在犬乳腺肿瘤形成过程中的作用,试验设计了针对犬VEGF基因的特异性引物,提取乳腺肿瘤组织RNA并扩增出目的片段,将PCR产物克隆到pGEM-T Easy栽体:经质粒PCR扩增、酶切和测序鉴定重组质粒,构建标准曲线等,成功建立了乳腺肿瘤VEGF基因实时荧光定量PCR检测方法.运用实时荧光定量PCR检测了40例不同的犬乳腺肿瘤病例、2例正常乳腺组织.结果发现:在犬恶性乳腺肿瘤组织中,VEGF基因表达量明显高于良性乳腺肿瘤和正常乳腺组织(P<0.001);在伴有淋巴结转移的犬乳腺癌组织中,VEGF基因表达量明显高于没有发现转移的乳腺癌组织(P<0.01),但VEGF基因的表达量与肿瘤的大小和发病动物年龄无关(P>0.05).VEGF基因在犬乳腺癌组织中的表达量远高于其在正常乳腺和良性乳腺肿瘤组织中的表达,且与淋巴结是否发生转移相关.因此,VEGF可作为犬乳腺癌转移、复发的预测指标之一.
為瞭準確地分析血管內皮生長因于(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在犬乳腺腫瘤形成過程中的作用,試驗設計瞭針對犬VEGF基因的特異性引物,提取乳腺腫瘤組織RNA併擴增齣目的片段,將PCR產物剋隆到pGEM-T Easy栽體:經質粒PCR擴增、酶切和測序鑒定重組質粒,構建標準麯線等,成功建立瞭乳腺腫瘤VEGF基因實時熒光定量PCR檢測方法.運用實時熒光定量PCR檢測瞭40例不同的犬乳腺腫瘤病例、2例正常乳腺組織.結果髮現:在犬噁性乳腺腫瘤組織中,VEGF基因錶達量明顯高于良性乳腺腫瘤和正常乳腺組織(P<0.001);在伴有淋巴結轉移的犬乳腺癌組織中,VEGF基因錶達量明顯高于沒有髮現轉移的乳腺癌組織(P<0.01),但VEGF基因的錶達量與腫瘤的大小和髮病動物年齡無關(P>0.05).VEGF基因在犬乳腺癌組織中的錶達量遠高于其在正常乳腺和良性乳腺腫瘤組織中的錶達,且與淋巴結是否髮生轉移相關.因此,VEGF可作為犬乳腺癌轉移、複髮的預測指標之一.
위료준학지분석혈관내피생장인우(Vascular endothelial growth factor,VEGF)재견유선종류형성과정중적작용,시험설계료침대견VEGF기인적특이성인물,제취유선종류조직RNA병확증출목적편단,장PCR산물극륭도pGEM-T Easy재체:경질립PCR확증、매절화측서감정중조질립,구건표준곡선등,성공건립료유선종류VEGF기인실시형광정량PCR검측방법.운용실시형광정량PCR검측료40례불동적견유선종류병례、2례정상유선조직.결과발현:재견악성유선종류조직중,VEGF기인표체량명현고우량성유선종류화정상유선조직(P<0.001);재반유림파결전이적견유선암조직중,VEGF기인표체량명현고우몰유발현전이적유선암조직(P<0.01),단VEGF기인적표체량여종류적대소화발병동물년령무관(P>0.05).VEGF기인재견유선암조직중적표체량원고우기재정상유선화량성유선종류조직중적표체,차여림파결시부발생전이상관.인차,VEGF가작위견유선암전이、복발적예측지표지일.