中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2008年
5期
6-11
,共6页
尚智%何金生%张梅%虞结梅%陆燕燕%谢灿%唐倩%魏薇
尚智%何金生%張梅%虞結梅%陸燕燕%謝燦%唐倩%魏薇
상지%하금생%장매%우결매%륙연연%사찬%당천%위미
人呼吸道合胞病毒%M蛋白%非复制型重组腺病毒
人呼吸道閤胞病毒%M蛋白%非複製型重組腺病毒
인호흡도합포병독%M단백%비복제형중조선병독
人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)基质蛋白(matrix protein,M)在RSV形态发生上具有重要作用,因含有CTL及CD4+ T细胞抗原表位,在疫苗研究上具有一定意义.为此,应用RT-PCR 方法从感染RSV的Hep-2 细胞中扩增获得M蛋白基因,构建了含M基因的非复制型重组腺病毒并进行表达和鉴定.基因序列分析显示RSV M基因仅有一处碱基发生错义突变.获得的非复制型重组腺病毒FGAd/RSVM感染293细胞,观察到细胞出现CPE,RT-PCR发现M基因有转录,Western blotting及间接免疫荧光分析检测到M蛋白.成功克隆A亚型RSV Long株M基因,并获得一株可表达A亚型RSV M蛋白的非复制型重组腺病毒FGAd/RSVM,可用于体内研究观察其免疫效果及免疫保护作用.
人呼吸道閤胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)基質蛋白(matrix protein,M)在RSV形態髮生上具有重要作用,因含有CTL及CD4+ T細胞抗原錶位,在疫苗研究上具有一定意義.為此,應用RT-PCR 方法從感染RSV的Hep-2 細胞中擴增穫得M蛋白基因,構建瞭含M基因的非複製型重組腺病毒併進行錶達和鑒定.基因序列分析顯示RSV M基因僅有一處堿基髮生錯義突變.穫得的非複製型重組腺病毒FGAd/RSVM感染293細胞,觀察到細胞齣現CPE,RT-PCR髮現M基因有轉錄,Western blotting及間接免疫熒光分析檢測到M蛋白.成功剋隆A亞型RSV Long株M基因,併穫得一株可錶達A亞型RSV M蛋白的非複製型重組腺病毒FGAd/RSVM,可用于體內研究觀察其免疫效果及免疫保護作用.
인호흡도합포병독(human respiratory syncytial virus,RSV)기질단백(matrix protein,M)재RSV형태발생상구유중요작용,인함유CTL급CD4+ T세포항원표위,재역묘연구상구유일정의의.위차,응용RT-PCR 방법종감염RSV적Hep-2 세포중확증획득M단백기인,구건료함M기인적비복제형중조선병독병진행표체화감정.기인서렬분석현시RSV M기인부유일처감기발생착의돌변.획득적비복제형중조선병독FGAd/RSVM감염293세포,관찰도세포출현CPE,RT-PCR발현M기인유전록,Western blotting급간접면역형광분석검측도M단백.성공극륭A아형RSV Long주M기인,병획득일주가표체A아형RSV M단백적비복제형중조선병독FGAd/RSVM,가용우체내연구관찰기면역효과급면역보호작용.
