CAJ | 학술논문

目的: 构建小儿呼吸道合胞病毒感染患者人源性噬菌体抗体库, 搭建人源性抗体制备的技术平台, 为小儿呼吸道合胞病毒感染发病机制的研究、诊断、治疗和预防提供新的有效途径.方法: 从52例呼吸道合胞病毒感染患儿外周血淋巴细胞中提取总RNA, 并逆转录为cDNA.用PCR扩增轻链和重链Fd段(即重链的可变区和第一恒定区)基因, 并将扩增的轻链和重链基因片段克隆于pComb3x噬粒载体, 电转化XL1-Blue大肠杆菌, 经辅助噬菌体M13K07超感染后构建成Fab段噬菌体抗体库.对此抗体库双酶切进行鉴定, 并用呼吸道合胞病毒颗粒作抗原进行初步筛选.结果: 经过重轻链基因的重组, 成功构建一免疫噬菌体抗体基因库, 共有2.6×106个不同的克隆菌, 其中70%的克隆均含有轻链和重链Fd 基因.因此, 所构建的噬菌体抗体库的库容量为1.8×106, 经初步筛选, 抗体库得到了不同程度的富集.结论: 利用基因重组技术和噬菌体展示技术, 成功构建小儿呼吸道合胞病毒感染患者人源性免疫噬菌体抗体库, 为进一步的研究奠定了基础.
목적: 구건소인호흡도합포병독감염환자인원성서균체항체고, 탑건인원성항체제비적기술평태, 위소인호흡도합포병독감염발병궤제적연구、진단、치료화예방제공신적유효도경.방법: 종52례호흡도합포병독감염환인외주혈림파세포중제취총RNA, 병역전록위cDNA.용PCR확증경련화중련Fd단(즉중련적가변구화제일항정구)기인, 병장확증적경련화중련기인편단극륭우pComb3x서립재체, 전전화XL1-Blue대장간균, 경보조서균체M13K07초감염후구건성Fab단서균체항체고.대차항체고쌍매절진행감정, 병용호흡도합포병독과립작항원진행초보사선.결과: 경과중경련기인적중조, 성공구건일면역서균체항체기인고, 공유2.6×106개불동적극륭균, 기중70%적극륭균함유경련화중련Fd 기인.인차, 소구건적서균체항체고적고용량위1.8×106, 경초보사선, 항체고득도료불동정도적부집.결론: 이용기인중조기술화서균체전시기술, 성공구건소인호흡도합포병독감염환자인원성면역서균체항체고, 위진일보적연구전정료기출.