CAJ | 학술논문

背景:组织工程修复大块组织缺损需要高浓度、大量的细胞接种,骨髓间充质干细胞是种子细胞的主要来源,但存在数量上的局限性及长期传代后细胞功能老化的问题.目的:体外分离培养、扩增人胎盘源性间充质干细胞与人骨髓间充质干细胞,并对其生物学性状进行比较.设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2008-09/2009-02在东直门医院实验室完成.材料:胎盘由解放军空军总医院妇产科提供,骨髓来源于健康成人献髓者.方法:采用密度梯度离心法从胎盘中分离、纯化和传代培养人胎盘源性间充质干细胞;骨髓肝素抗凝后,采用密度梯度离心法分离、纯化和传代培养入骨髓基质干细胞.主要观察指标:用倒置相差显微镜观察两种细胞形态及细胞生长情况,流式细胞仪分析检测第5代细胞表面标志的表达,Von Kossa染色及油红O染色检测分化能力.结果:镜下两种细胞均为贴壁生长,形态为均一成纤维细胞样,传5代后细胞的增殖能力随传代次数的增加而有所下降,体外培养10代后细胞生长速度减慢,但人胎盘源性间充质干细胞扩增倍数较人骨髓基质干细胞平均高出两三个数量级.两种细胞具有均一的细胞衷型,均表达CD29,CD44,CD166,不表达CD34,CD45,HLA-DR.两种细胞都具有成骨、成脂分化潜能,但人胎盘源性间充质干细胞分化潜能更强.结论:人胎盘源性间充质干细胞与人骨髓基质干细胞具有相似的生物学特性,且前者具有更强的增殖能力.
배경:조직공정수복대괴조직결손수요고농도、대량적세포접충,골수간충질간세포시충자세포적주요래원,단존재수량상적국한성급장기전대후세포공능노화적문제.목적:체외분리배양、확증인태반원성간충질간세포여인골수간충질간세포,병대기생물학성상진행비교.설계、시간급지점:세포학체외대조관찰,우2008-09/2009-02재동직문의원실험실완성.재료:태반유해방군공군총의원부산과제공,골수래원우건강성인헌수자.방법:채용밀도제도리심법종태반중분리、순화화전대배양인태반원성간충질간세포;골수간소항응후,채용밀도제도리심법분리、순화화전대배양입골수기질간세포.주요관찰지표:용도치상차현미경관찰량충세포형태급세포생장정황,류식세포의분석검측제5대세포표면표지적표체,Von Kossa염색급유홍O염색검측분화능력.결과:경하량충세포균위첩벽생장,형태위균일성섬유세포양,전5대후세포적증식능력수전대차수적증가이유소하강,체외배양10대후세포생장속도감만,단인태반원성간충질간세포확증배수교인골수기질간세포평균고출량삼개수량급.량충세포구유균일적세포충형,균표체CD29,CD44,CD166,불표체CD34,CD45,HLA-DR.량충세포도구유성골、성지분화잠능,단인태반원성간충질간세포분화잠능경강.결론:인태반원성간충질간세포여인골수기질간세포구유상사적생물학특성,차전자구유경강적증식능력.