中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2010年
4期
482-485,502
,共5页
赖宽%曾凡钦%魏菁%郭庆%何嘉辉%谭国珍%李伯有
賴寬%曾凡欽%魏菁%郭慶%何嘉輝%譚國珍%李伯有
뢰관%증범흠%위정%곽경%하가휘%담국진%리백유
SLE%角质形成细胞%CCK-8%凋亡%细胞周期
SLE%角質形成細胞%CCK-8%凋亡%細胞週期
SLE%각질형성세포%CCK-8%조망%세포주기
[目的]体外培养系统性红斑狼疮(SEE)皮损部位角质形成细胞(KC),观察其细胞学特性.[方法]原代培养SLE皮损和正常皮肤的角质形成细胞,倒置显微镜观察细胞的形态特点.免疫荧光法进行角蛋白检测并计算细胞纯度:两步消化法纯化细胞;CCK-8(cell counting Kit-8)评价细胞的增殖情况,绘制生长曲线.流式细胞仪观察细胞的生长周期和凋亡情况.[结果]使用K-SFM(serum.free keratinocyte medium)无血清培养基能成功体外培养SLE皮损的角质形成细胞,呈铺路石样.结合人工纯化,能达到>95%的纯度;与正常对照相比,SLE皮损角质形成细胞进入指数生长期较迟(7 d vs.4 d),但进入后增长迅速,S期比例为:(40.68±1.81)%%vs.(34.43±1.24)%(P<0.05);凋亡率高:(6.08±0.72)%眠(4.32±0.44)%(P<0.05).[结论]SLE皮损角质形成细胞培养难度大,细胞的生物学行为存在异常,可能为SLE发病的独立、始发因素,其致病机制值得深入研究和探讨.
[目的]體外培養繫統性紅斑狼瘡(SEE)皮損部位角質形成細胞(KC),觀察其細胞學特性.[方法]原代培養SLE皮損和正常皮膚的角質形成細胞,倒置顯微鏡觀察細胞的形態特點.免疫熒光法進行角蛋白檢測併計算細胞純度:兩步消化法純化細胞;CCK-8(cell counting Kit-8)評價細胞的增殖情況,繪製生長麯線.流式細胞儀觀察細胞的生長週期和凋亡情況.[結果]使用K-SFM(serum.free keratinocyte medium)無血清培養基能成功體外培養SLE皮損的角質形成細胞,呈鋪路石樣.結閤人工純化,能達到>95%的純度;與正常對照相比,SLE皮損角質形成細胞進入指數生長期較遲(7 d vs.4 d),但進入後增長迅速,S期比例為:(40.68±1.81)%%vs.(34.43±1.24)%(P<0.05);凋亡率高:(6.08±0.72)%眠(4.32±0.44)%(P<0.05).[結論]SLE皮損角質形成細胞培養難度大,細胞的生物學行為存在異常,可能為SLE髮病的獨立、始髮因素,其緻病機製值得深入研究和探討.
[목적]체외배양계통성홍반랑창(SEE)피손부위각질형성세포(KC),관찰기세포학특성.[방법]원대배양SLE피손화정상피부적각질형성세포,도치현미경관찰세포적형태특점.면역형광법진행각단백검측병계산세포순도:량보소화법순화세포;CCK-8(cell counting Kit-8)평개세포적증식정황,회제생장곡선.류식세포의관찰세포적생장주기화조망정황.[결과]사용K-SFM(serum.free keratinocyte medium)무혈청배양기능성공체외배양SLE피손적각질형성세포,정포로석양.결합인공순화,능체도>95%적순도;여정상대조상비,SLE피손각질형성세포진입지수생장기교지(7 d vs.4 d),단진입후증장신속,S기비례위:(40.68±1.81)%%vs.(34.43±1.24)%(P<0.05);조망솔고:(6.08±0.72)%면(4.32±0.44)%(P<0.05).[결론]SLE피손각질형성세포배양난도대,세포적생물학행위존재이상,가능위SLE발병적독립、시발인소,기치병궤제치득심입연구화탐토.
