解剖科学进展
解剖科學進展
해부과학진전
PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES
2010年
5期
409-412
,共4页
王占强%李叶丹%李春宇%张极星%王全才%贾春红%张鸿
王佔彊%李葉丹%李春宇%張極星%王全纔%賈春紅%張鴻
왕점강%리협단%리춘우%장겁성%왕전재%가춘홍%장홍
神经母细胞瘤%AIF基因%RNA干扰%基因表达
神經母細胞瘤%AIF基因%RNA榦擾%基因錶達
신경모세포류%AIF기인%RNA간우%기인표체
目的 探讨AIF基因短发夹RNA(shRNA)表达质粒对神经母细胞瘤细胞(SHSY5YAIF)基因的干扰作用.方法 根据siRNA设计原则,构建靶向AIF基因的短发夹RNA干扰质粒(pGPU6/GFP/AIF),使用脂质体法转染人神经母细胞瘤细胞,通过RT-PCR和Wester blot印迹检测神经母细胞瘤细胞AIF基因mRNA和蛋白表达水平.结果 pGPU6/GFP/AIF重组质粒经限制性内切酶酶切及测序证明基因插入正确.质粒成功转染SHSY5Y细胞后,该细胞的AIFmRNA和蛋白表达明显下降(P＜0.05).结论 成功构建靶向AIF基因的shRNA表达载体转染神经母细胞瘤细胞,有效抑制AIFmRNA和蛋白表达,为AIF基因靶向治疗提供前期的实验依据.
目的 探討AIF基因短髮夾RNA(shRNA)錶達質粒對神經母細胞瘤細胞(SHSY5YAIF)基因的榦擾作用.方法 根據siRNA設計原則,構建靶嚮AIF基因的短髮夾RNA榦擾質粒(pGPU6/GFP/AIF),使用脂質體法轉染人神經母細胞瘤細胞,通過RT-PCR和Wester blot印跡檢測神經母細胞瘤細胞AIF基因mRNA和蛋白錶達水平.結果 pGPU6/GFP/AIF重組質粒經限製性內切酶酶切及測序證明基因插入正確.質粒成功轉染SHSY5Y細胞後,該細胞的AIFmRNA和蛋白錶達明顯下降(P＜0.05).結論 成功構建靶嚮AIF基因的shRNA錶達載體轉染神經母細胞瘤細胞,有效抑製AIFmRNA和蛋白錶達,為AIF基因靶嚮治療提供前期的實驗依據.
목적 탐토AIF기인단발협RNA(shRNA)표체질립대신경모세포류세포(SHSY5YAIF)기인적간우작용.방법 근거siRNA설계원칙,구건파향AIF기인적단발협RNA간우질립(pGPU6/GFP/AIF),사용지질체법전염인신경모세포류세포,통과RT-PCR화Wester blot인적검측신경모세포류세포AIF기인mRNA화단백표체수평.결과 pGPU6/GFP/AIF중조질립경한제성내절매매절급측서증명기인삽입정학.질립성공전염SHSY5Y세포후,해세포적AIFmRNA화단백표체명현하강(P＜0.05).결론 성공구건파향AIF기인적shRNA표체재체전염신경모세포류세포,유효억제AIFmRNA화단백표체,위AIF기인파향치료제공전기적실험의거.
