山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2011年
1期
15-17
,共3页
曲颂%朱小东%李相德%李龄%黎丹戎%张玮
麯頌%硃小東%李相德%李齡%黎丹戎%張瑋
곡송%주소동%리상덕%리령%려단융%장위
RNA干扰%CDC25A%CNE-2%加速再增殖
RNA榦擾%CDC25A%CNE-2%加速再增殖
RNA간우%CDC25A%CNE-2%가속재증식
目的 采用RNA干扰技术沉默CDC25A基因,观察其对鼻咽低分化鳞癌细胞株(CNE-2)在连续照射中后期加速增殖现象的影响.方法 构建、培养出CDC25A基因沉默效果稳定的CNE2-psilence4.1-CDC25A,接受射线2 Gy/d连续照射5 d,分别采用MTT法、流式细胞术检测细胞的生长增殖活性,并在mRNA及蛋白水平上应用RT-PCR、Western Blot法进行验证.结果 MTT法检测结果表明,CNE2-psilence4.1-CDC25A细胞存活分数(SF)在第5天达到高峰,CNE2-psilence4.1-Control细胞SF在第3天达到高峰.流式细胞术检测结果显示,CNE2-psilence-4.1-CDC25A细胞在照射第5天S期细胞比(SPF)及增殖指数(PI)为最高值,CNE2-psilence4.1-Control细胞在照射第3天SPF值最高,在照射第4天PI值最高;RT-PCR、Western Blot法进一步验证CNE2-psilence4.1-CDC25A细胞在照射第1、3、5天的CDC25A的表达与MTT法、流式细胞术检测结果基本吻合.结论 与CNE2-psilencer4.1-Control细胞相比,基因沉默的CNE2-psilencer4.1-CDC25A细胞在连续分割照射期间,细胞的生长速度减慢、生长高峰延迟.
目的 採用RNA榦擾技術沉默CDC25A基因,觀察其對鼻嚥低分化鱗癌細胞株(CNE-2)在連續照射中後期加速增殖現象的影響.方法 構建、培養齣CDC25A基因沉默效果穩定的CNE2-psilence4.1-CDC25A,接受射線2 Gy/d連續照射5 d,分彆採用MTT法、流式細胞術檢測細胞的生長增殖活性,併在mRNA及蛋白水平上應用RT-PCR、Western Blot法進行驗證.結果 MTT法檢測結果錶明,CNE2-psilence4.1-CDC25A細胞存活分數(SF)在第5天達到高峰,CNE2-psilence4.1-Control細胞SF在第3天達到高峰.流式細胞術檢測結果顯示,CNE2-psilence-4.1-CDC25A細胞在照射第5天S期細胞比(SPF)及增殖指數(PI)為最高值,CNE2-psilence4.1-Control細胞在照射第3天SPF值最高,在照射第4天PI值最高;RT-PCR、Western Blot法進一步驗證CNE2-psilence4.1-CDC25A細胞在照射第1、3、5天的CDC25A的錶達與MTT法、流式細胞術檢測結果基本吻閤.結論 與CNE2-psilencer4.1-Control細胞相比,基因沉默的CNE2-psilencer4.1-CDC25A細胞在連續分割照射期間,細胞的生長速度減慢、生長高峰延遲.
목적 채용RNA간우기술침묵CDC25A기인,관찰기대비인저분화린암세포주(CNE-2)재련속조사중후기가속증식현상적영향.방법 구건、배양출CDC25A기인침묵효과은정적CNE2-psilence4.1-CDC25A,접수사선2 Gy/d련속조사5 d,분별채용MTT법、류식세포술검측세포적생장증식활성,병재mRNA급단백수평상응용RT-PCR、Western Blot법진행험증.결과 MTT법검측결과표명,CNE2-psilence4.1-CDC25A세포존활분수(SF)재제5천체도고봉,CNE2-psilence4.1-Control세포SF재제3천체도고봉.류식세포술검측결과현시,CNE2-psilence-4.1-CDC25A세포재조사제5천S기세포비(SPF)급증식지수(PI)위최고치,CNE2-psilence4.1-Control세포재조사제3천SPF치최고,재조사제4천PI치최고;RT-PCR、Western Blot법진일보험증CNE2-psilence4.1-CDC25A세포재조사제1、3、5천적CDC25A적표체여MTT법、류식세포술검측결과기본문합.결론 여CNE2-psilencer4.1-Control세포상비,기인침묵적CNE2-psilencer4.1-CDC25A세포재련속분할조사기간,세포적생장속도감만、생장고봉연지.
