CAJ | 학술논문

目的:探讨人支气管上皮(HBE)细胞内5-脂氧合酶(5-LOX)对4-氨基联苯(4-ABP)的氧化活化及所致DNA损伤,为LOX作为前致癌物氧化活化的代谢途径提供依据.方法:①体外酶系统实验:4-ABP在含有大豆脂氧合酶(SLO)的体外酶体系中反应,用分光光度法检测体系中反应产物生成.②细胞实验:4-ABP 100-800μmol·L-1染毒HBE细胞,MTT法检测HBE细胞存活率;Western印迹法检刚5-LOX蛋白表达;单细胞凝胶电泳检测DNA损伤.同时,检测特异性5-LOX抑制剂AA861时5-LOX蛋白表达和多种酶抑制剂对细胞存活率和DNA损伤的影响.结果:在过氧化氢参与下,SLO可以协同氧化4-ABP,LOX抑制剂去甲二氢愈创木酸可抑制该协同氧化作用.4-ABP可以使HBE细胞内5-LOX蛋白表达增加,AA861对5-LOX蛋白表达没有影响;4-ABP 400μmol·L-1可以使HBE细胞产生明显的DNA损伤,彗星细胞的阳性率达47.7%(P<0.01),AA861和萘普生可以抑制该浓度4-ABP所致的DNA损伤,最大保护率分别为58.1%和21.7%.结论:4-ABP上调HBE的5-LOX蛋白表达.5-LOX可能通过介导4-ABP协同氧化,导致DNA损伤,这可能是4-ABP致癌的机制之一.
목적:탐토인지기관상피(HBE)세포내5-지양합매(5-LOX)대4-안기련분(4-ABP)적양화활화급소치DNA손상,위LOX작위전치암물양화활화적대사도경제공의거.방법:①체외매계통실험:4-ABP재함유대두지양합매(SLO)적체외매체계중반응,용분광광도법검측체계중반응산물생성.②세포실험:4-ABP 100-800μmol·L-1염독HBE세포,MTT법검측HBE세포존활솔;Western인적법검강5-LOX단백표체;단세포응효전영검측DNA손상.동시,검측특이성5-LOX억제제AA861시5-LOX단백표체화다충매억제제대세포존활솔화DNA손상적영향.결과:재과양화경삼여하,SLO가이협동양화4-ABP,LOX억제제거갑이경유창목산가억제해협동양화작용.4-ABP가이사HBE세포내5-LOX단백표체증가,AA861대5-LOX단백표체몰유영향;4-ABP 400μmol·L-1가이사HBE세포산생명현적DNA손상,혜성세포적양성솔체47.7%(P<0.01),AA861화내보생가이억제해농도4-ABP소치적DNA손상,최대보호솔분별위58.1%화21.7%.결론:4-ABP상조HBE적5-LOX단백표체.5-LOX가능통과개도4-ABP협동양화,도치DNA손상,저가능시4-ABP치암적궤제지일.