实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2012年
7期
482-485
,共4页
郑锐丹%廖丽红%王成斌%高金枝%应艳琴%宁琴%罗小平
鄭銳丹%廖麗紅%王成斌%高金枝%應豔琴%寧琴%囉小平
정예단%료려홍%왕성빈%고금지%응염금%저금%라소평
胰岛素受体底物1%RNA干扰%CCAAT增强子结合蛋白α%过氧化物酶体增殖物激活受体γ%3T3-L1前脂肪细胞
胰島素受體底物1%RNA榦擾%CCAAT增彊子結閤蛋白α%過氧化物酶體增殖物激活受體γ%3T3-L1前脂肪細胞
이도소수체저물1%RNA간우%CCAAT증강자결합단백α%과양화물매체증식물격활수체γ%3T3-L1전지방세포
目的 研究胰岛素受体底物1(IRS-I)沉默对3T3-L1前脂肪细胞分化关键分子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ) mRNA及蛋白表达的影响,并观察IRS-1沉默后前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞能力的改变,探讨胰岛素受体底物(IRSs)是否作为C/EBPα 、PPAR-γ的上游调节信号在前脂肪细胞分化中起到重要的调节作用.方法 合成4条IRS-I shRNA,Western blotting筛选出沉默效率最高的1条.3T3-L1前脂肪细胞分为IRS-1沉默组和对照组.IRS-1沉默组细胞用沉默效率最高的IRS-1 shRNA质粒转染3T3-LI前脂肪细胞,沉默细胞中的IRS-1分子；对照组采用无意义IRS-1 shRNA质粒转染3T3-L1前脂肪细胞.转染24h后诱导其分化成熟,分化72 h后检测促进前脂肪细胞分化的关键分子C/EBPα、PPARγ的表达.继续诱导分化至第7天,油红O染色观察IRS-1沉默后前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞的比例,检测其分化能力的改变.结果 与对照组相比,IRS-1沉默组在诱导分化72 h后,Real-time PCR结果显示3T3-L1前脂肪细胞中C/EBPα mRNA、PPARγ mRNA表达明显下降(Pa＜0.05),Western blotting结果显示C/EBPα、PPARγ蛋白水平也同样显著下降(Pa＜0.05)；细胞继续分化至第7天,油红O染色显示,IRS-1沉默组前脂肪细胞分化成熟的比例与对照组比较显著降低.结论 胰岛素可能通过IRS-1刺激C/EBPα、PPARγ的表达促进前脂肪组织的分化.
目的 研究胰島素受體底物1(IRS-I)沉默對3T3-L1前脂肪細胞分化關鍵分子CCAAT增彊子結閤蛋白α(C/EBPα)、過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ) mRNA及蛋白錶達的影響,併觀察IRS-1沉默後前脂肪細胞分化為成熟脂肪細胞能力的改變,探討胰島素受體底物(IRSs)是否作為C/EBPα 、PPAR-γ的上遊調節信號在前脂肪細胞分化中起到重要的調節作用.方法 閤成4條IRS-I shRNA,Western blotting篩選齣沉默效率最高的1條.3T3-L1前脂肪細胞分為IRS-1沉默組和對照組.IRS-1沉默組細胞用沉默效率最高的IRS-1 shRNA質粒轉染3T3-LI前脂肪細胞,沉默細胞中的IRS-1分子；對照組採用無意義IRS-1 shRNA質粒轉染3T3-L1前脂肪細胞.轉染24h後誘導其分化成熟,分化72 h後檢測促進前脂肪細胞分化的關鍵分子C/EBPα、PPARγ的錶達.繼續誘導分化至第7天,油紅O染色觀察IRS-1沉默後前脂肪細胞分化為成熟脂肪細胞的比例,檢測其分化能力的改變.結果 與對照組相比,IRS-1沉默組在誘導分化72 h後,Real-time PCR結果顯示3T3-L1前脂肪細胞中C/EBPα mRNA、PPARγ mRNA錶達明顯下降(Pa＜0.05),Western blotting結果顯示C/EBPα、PPARγ蛋白水平也同樣顯著下降(Pa＜0.05)；細胞繼續分化至第7天,油紅O染色顯示,IRS-1沉默組前脂肪細胞分化成熟的比例與對照組比較顯著降低.結論 胰島素可能通過IRS-1刺激C/EBPα、PPARγ的錶達促進前脂肪組織的分化.
목적 연구이도소수체저물1(IRS-I)침묵대3T3-L1전지방세포분화관건분자CCAAT증강자결합단백α(C/EBPα)、과양화물매체증식물격활수체γ(PPARγ) mRNA급단백표체적영향,병관찰IRS-1침묵후전지방세포분화위성숙지방세포능력적개변,탐토이도소수체저물(IRSs)시부작위C/EBPα 、PPAR-γ적상유조절신호재전지방세포분화중기도중요적조절작용.방법 합성4조IRS-I shRNA,Western blotting사선출침묵효솔최고적1조.3T3-L1전지방세포분위IRS-1침묵조화대조조.IRS-1침묵조세포용침묵효솔최고적IRS-1 shRNA질립전염3T3-LI전지방세포,침묵세포중적IRS-1분자；대조조채용무의의IRS-1 shRNA질립전염3T3-L1전지방세포.전염24h후유도기분화성숙,분화72 h후검측촉진전지방세포분화적관건분자C/EBPα、PPARγ적표체.계속유도분화지제7천,유홍O염색관찰IRS-1침묵후전지방세포분화위성숙지방세포적비례,검측기분화능력적개변.결과 여대조조상비,IRS-1침묵조재유도분화72 h후,Real-time PCR결과현시3T3-L1전지방세포중C/EBPα mRNA、PPARγ mRNA표체명현하강(Pa＜0.05),Western blotting결과현시C/EBPα、PPARγ단백수평야동양현저하강(Pa＜0.05)；세포계속분화지제7천,유홍O염색현시,IRS-1침묵조전지방세포분화성숙적비례여대조조비교현저강저.결론 이도소가능통과IRS-1자격C/EBPα、PPARγ적표체촉진전지방조직적분화.
