中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2003年
4期
436-440
,共5页
侯晓军%畅文军%陈立钊%张政%刘知学%王转花
侯曉軍%暢文軍%陳立釗%張政%劉知學%王轉花
후효군%창문군%진립쇠%장정%류지학%왕전화
苦荞%过敏蛋白%3′-RACE%克隆与序列分析
苦蕎%過敏蛋白%3′-RACE%剋隆與序列分析
고교%과민단백%3′-RACE%극륭여서렬분석
为了获得苦荞中主要过敏原的cDNA和由此推导的蛋白质序列, 分析其结构特点, 以苦荞幼根根尖为材料, 提取总RNA并反转录mRNA为cDNA第一链.通过RT-PCR、3′ RACE、基因克隆及序列测定,获得一种苦荞主要过敏蛋白基因的cDNA片段 (GenBank 登录号为AY044918). 该cDNA片段由768 bp组成,包括3′端非编码区180个bp,开放阅读框588 bp. 可编码一个由195个氨基酸残基组成的功能蛋白及一个终止密码. 苦荞主要过敏原基因与甜荞22 kD过敏蛋白、豆球类蛋白的核苷酸序列分别有95%和93%的同源性. 其推导的氨基酸序列与甜荞球蛋白、刀豆蛋白、甜橙柠檬素分别有93%、83%和57%的同源性. 该过敏蛋白183～188位氨基酸残基KEEEKE在多数不同过敏原中均存在, 推测可能为其中的抗原决定簇序列.
為瞭穫得苦蕎中主要過敏原的cDNA和由此推導的蛋白質序列, 分析其結構特點, 以苦蕎幼根根尖為材料, 提取總RNA併反轉錄mRNA為cDNA第一鏈.通過RT-PCR、3′ RACE、基因剋隆及序列測定,穫得一種苦蕎主要過敏蛋白基因的cDNA片段 (GenBank 登錄號為AY044918). 該cDNA片段由768 bp組成,包括3′耑非編碼區180箇bp,開放閱讀框588 bp. 可編碼一箇由195箇氨基痠殘基組成的功能蛋白及一箇終止密碼. 苦蕎主要過敏原基因與甜蕎22 kD過敏蛋白、豆毬類蛋白的覈苷痠序列分彆有95%和93%的同源性. 其推導的氨基痠序列與甜蕎毬蛋白、刀豆蛋白、甜橙檸檬素分彆有93%、83%和57%的同源性. 該過敏蛋白183～188位氨基痠殘基KEEEKE在多數不同過敏原中均存在, 推測可能為其中的抗原決定簇序列.
위료획득고교중주요과민원적cDNA화유차추도적단백질서렬, 분석기결구특점, 이고교유근근첨위재료, 제취총RNA병반전록mRNA위cDNA제일련.통과RT-PCR、3′ RACE、기인극륭급서렬측정,획득일충고교주요과민단백기인적cDNA편단 (GenBank 등록호위AY044918). 해cDNA편단유768 bp조성,포괄3′단비편마구180개bp,개방열독광588 bp. 가편마일개유195개안기산잔기조성적공능단백급일개종지밀마. 고교주요과민원기인여첨교22 kD과민단백、두구류단백적핵감산서렬분별유95%화93%적동원성. 기추도적안기산서렬여첨교구단백、도두단백、첨등저몽소분별유93%、83%화57%적동원성. 해과민단백183～188위안기산잔기KEEEKE재다수불동과민원중균존재, 추측가능위기중적항원결정족서렬.
