带Tat标记质粒载体的构建及其转导融合蛋白进入细胞的研究
대Tat표기질립재체적구건급기전도융합단백진입세포적연구
Construction of Plasmid Vector with Tat and the Study of Its Ability Transduct Fusion Protein into Cells
  • 万方数据
    中国生物化学与分子生物学报 중국생물화학여분자생물학보
    CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
    2003年 3期 354-358 ,共5页

    孙学刚%宋革%刘靖华%李红乐%邢飞跃%张丽华%秦清和%姜勇

    손학강%송혁%류정화%리홍악%형비약%장려화%진청화%강용

    Tat%蛋白转导%增强型绿色荧光蛋白 Tat%蛋白轉導%增彊型綠色熒光蛋白
    Tat%단백전도%증강형록색형광단백
    采用点突变技术构建了带6×His、Tat和Flag多个标记的pET-HTF的质粒载体,利用基因重组技术构建pET-HTF-EGFP融合蛋白载体.酶切和DNA测序证明,所构建的pET-HTF和pET-HTF-EGFP载体正确.BL21(DE3)表达融合蛋白,用Ni2+分离柱纯化His-Tat-Flag-EGFP蛋白,并加入培养的NIH3T3细胞.荧光显微镜观察显示,His-Tat-Flag-EGFP融合蛋白进入细胞.带His、Tat和Flag标记的质粒载体pET-14b-HTF表达的融合蛋白能够进入细胞,该载体为进行蛋白质功能研究和基因治疗研究提供了一个重要工具.
    채용점돌변기술구건료대6×His、Tat화Flag다개표기적pET-HTF적질립재체,이용기인중조기술구건pET-HTF-EGFP융합단백재체.매절화DNA측서증명,소구건적pET-HTF화pET-HTF-EGFP재체정학.BL21(DE3)표체융합단백,용Ni2+분리주순화His-Tat-Flag-EGFP단백,병가입배양적NIH3T3세포.형광현미경관찰현시,His-Tat-Flag-EGFP융합단백진입세포.대His、Tat화Flag표기적질립재체pET-14b-HTF표체적융합단백능구진입세포,해재체위진행단백질공능연구화기인치료연구제공료일개중요공구.
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