华中科技大学学报(医学版)
華中科技大學學報(醫學版)
화중과기대학학보(의학판)
JOURNAL OF HUAZHONG UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(HEALTH SCIENCES)
2004年
2期
109-112
,共4页
apoE%基因克隆%定点突变%基因表达
apoE%基因剋隆%定點突變%基因錶達
apoE%기인극륭%정점돌변%기인표체
目的克隆人3种类型载脂蛋白E (apolipoprotein E,apoE) cDNA,表达并纯化3种apoE融合蛋白.方法采用RT-PCR方法从肝组织中克隆得到apoE3 cDNA,以此为基础通过定点突变得到apoE2和apoE4的cDNA.将上述3种cDNA亚克隆到含有His标签的融合表达载体pT7-PL中,表达的蛋白经镍离子柱亲和层析纯化.结果序列分析表明,获得的apoE2、apoE3、apoE4与GenBank中的一致.表达并纯化了N端带有6个组氨酸的apoE2、apoE3、apoE4融合蛋白.结论成功地获得了人3种类型apoE cDNA和3种apoE融合蛋白.
目的剋隆人3種類型載脂蛋白E (apolipoprotein E,apoE) cDNA,錶達併純化3種apoE融閤蛋白.方法採用RT-PCR方法從肝組織中剋隆得到apoE3 cDNA,以此為基礎通過定點突變得到apoE2和apoE4的cDNA.將上述3種cDNA亞剋隆到含有His標籤的融閤錶達載體pT7-PL中,錶達的蛋白經鎳離子柱親和層析純化.結果序列分析錶明,穫得的apoE2、apoE3、apoE4與GenBank中的一緻.錶達併純化瞭N耑帶有6箇組氨痠的apoE2、apoE3、apoE4融閤蛋白.結論成功地穫得瞭人3種類型apoE cDNA和3種apoE融閤蛋白.
목적극륭인3충류형재지단백E (apolipoprotein E,apoE) cDNA,표체병순화3충apoE융합단백.방법채용RT-PCR방법종간조직중극륭득도apoE3 cDNA,이차위기출통과정점돌변득도apoE2화apoE4적cDNA.장상술3충cDNA아극륭도함유His표첨적융합표체재체pT7-PL중,표체적단백경얼리자주친화층석순화.결과서렬분석표명,획득적apoE2、apoE3、apoE4여GenBank중적일치.표체병순화료N단대유6개조안산적apoE2、apoE3、apoE4융합단백.결론성공지획득료인3충류형apoE cDNA화3충apoE융합단백.
