生殖与避孕
生殖與避孕
생식여피잉
REPRODUCTION AND CONTRACEPTION
2005年
8期
451-455
,共5页
黄萍%黄哲平%沈卫英%王健%申庆祥
黃萍%黃哲平%瀋衛英%王健%申慶祥
황평%황철평%침위영%왕건%신경상
着床%着床丝氨酸蛋白酶-2%表达%昆虫-杆状病毒系统
著床%著床絲氨痠蛋白酶-2%錶達%昆蟲-桿狀病毒繫統
착상%착상사안산단백매-2%표체%곤충-간상병독계통
目的:利用昆虫细胞表达着床丝氨酸蛋白酶-2(implantation serine proteinase-2,ISP2).方法:将ISP2 cDNA克隆入核型多角体病毒(AcNPV)非融合蛋白基因表达载体pVL1392,获得的重组表达载体pVL1392/ISP2,与BaculGoldTM线性杆状病毒DNA共转染昆虫细胞Sf9,经多次扩增后获得高滴度的重组病毒AcNPV-ISP2.将此重组病毒感染昆虫细胞,收集转染细胞培养上清液.结果:用SDS-PAGE考马斯亮蓝染色和Western blot测得培养上清液中有表达蛋白,分子量为40kD左右.结论:用杆状病毒系统表达的ISP2能分泌到细胞外,有利于产物的分离纯化,为进一步研究ISP2在着床中的生物功能奠定了基础.
目的:利用昆蟲細胞錶達著床絲氨痠蛋白酶-2(implantation serine proteinase-2,ISP2).方法:將ISP2 cDNA剋隆入覈型多角體病毒(AcNPV)非融閤蛋白基因錶達載體pVL1392,穫得的重組錶達載體pVL1392/ISP2,與BaculGoldTM線性桿狀病毒DNA共轉染昆蟲細胞Sf9,經多次擴增後穫得高滴度的重組病毒AcNPV-ISP2.將此重組病毒感染昆蟲細胞,收集轉染細胞培養上清液.結果:用SDS-PAGE攷馬斯亮藍染色和Western blot測得培養上清液中有錶達蛋白,分子量為40kD左右.結論:用桿狀病毒繫統錶達的ISP2能分泌到細胞外,有利于產物的分離純化,為進一步研究ISP2在著床中的生物功能奠定瞭基礎.
목적:이용곤충세포표체착상사안산단백매-2(implantation serine proteinase-2,ISP2).방법:장ISP2 cDNA극륭입핵형다각체병독(AcNPV)비융합단백기인표체재체pVL1392,획득적중조표체재체pVL1392/ISP2,여BaculGoldTM선성간상병독DNA공전염곤충세포Sf9,경다차확증후획득고적도적중조병독AcNPV-ISP2.장차중조병독감염곤충세포,수집전염세포배양상청액.결과:용SDS-PAGE고마사량람염색화Western blot측득배양상청액중유표체단백,분자량위40kD좌우.결론:용간상병독계통표체적ISP2능분비도세포외,유리우산물적분리순화,위진일보연구ISP2재착상중적생물공능전정료기출.
