CAJ | 학술논문

目的探索比较β-L-D4A(L-D4A)及其异构体体外抗HBV作用,以期获得高效、高治疗指数(TI)的新一类抗HBV化合物.方法L-D4A及其异构体干预2.2.15细胞(Hep G2细胞进行HBV基因组转染后所得)培养,ELISA法检测上清HBs Ag,HBe Ag;32P标记HBV DNA为探针,Southern印迹法检测上清液及细胞内HBV DNA,再以计算机图像处理进行定量分析,求出50%抑制的药物浓度(ED50).洗去HBV探针后,以32p标记细胞色素氧化酶ⅢDNA为探针再次进行杂交,以探索线粒体的毒性.以MTT法检测不同浓度药物的细胞毒性,求出50%细胞抑制的药物浓度(ID50).结果上清液病毒DNA的Southern印迹结果显示,L型异构体较之D型异构体具有更强的HBV DNA抑制作用,L-D4A最为突出,并呈显明显的浓度依赖性,计算出ED50为0.2μmol·L-1;D-D4A具有明显的线粒体毒性,L-D4A则不明显;L-D4A细胞毒性实验显示ID50为200 μmol·L-1;低浓度L-D4A对上清HBsAg,HBeAg无明显的影响,高浓度时有显著的抑制作用.结论体外实验显示L-D4A具有明显的抑制病毒DNA复制作用,且无明显的细胞毒性和线粒体毒性,TI(ID50/ED50)值为1 000,高于拉米夫定组(TI值为750),将有望进一步得到开发.
목적탐색비교β-L-D4A(L-D4A)급기이구체체외항HBV작용,이기획득고효、고치료지수(TI)적신일류항HBV화합물.방법L-D4A급기이구체간예2.2.15세포(Hep G2세포진행HBV기인조전염후소득)배양,ELISA법검측상청HBs Ag,HBe Ag;32P표기HBV DNA위탐침,Southern인적법검측상청액급세포내HBV DNA,재이계산궤도상처리진행정량분석,구출50%억제적약물농도(ED50).세거HBV탐침후,이32p표기세포색소양화매ⅢDNA위탐침재차진행잡교,이탐색선립체적독성.이MTT법검측불동농도약물적세포독성,구출50%세포억제적약물농도(ID50).결과상청액병독DNA적Southern인적결과현시,L형이구체교지D형이구체구유경강적HBV DNA억제작용,L-D4A최위돌출,병정현명현적농도의뢰성,계산출ED50위0.2μmol·L-1;D-D4A구유명현적선립체독성,L-D4A칙불명현;L-D4A세포독성실험현시ID50위200 μmol·L-1;저농도L-D4A대상청HBsAg,HBeAg무명현적영향,고농도시유현저적억제작용.결론체외실험현시L-D4A구유명현적억제병독DNA복제작용,차무명현적세포독성화선립체독성,TI(ID50/ED50)치위1 000,고우랍미부정조(TI치위750),장유망진일보득도개발.