生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
1期
60-63
,共4页
华承伟%谢凤珍%王建华%史贤明
華承偉%謝鳳珍%王建華%史賢明
화승위%사봉진%왕건화%사현명
毕赤嗜甲醇酵母%黑曲霉菊粉内切酶%高密度培养
畢赤嗜甲醇酵母%黑麯黴菊粉內切酶%高密度培養
필적기갑순효모%흑곡매국분내절매%고밀도배양
目的:对毕赤嗜甲醇酵母工程菌inu-26高密度培养表达黑曲霉菊粉内切酶的条件进行优化,找出最佳的外源蛋白表达条件.方法:在摇瓶优化培养的基础上进行发酵罐高密度培养,优化最佳产酶条件.结果:以葡萄糖为碳源、微量元素添加量100~200 mL/L、甲醇浓度l g/L、pH6.0~7.0、诱导时间96 h时酶的表达量最高;摇瓶模拟高密度培养表明影响酵母生长的最主要因素葡萄糖和硫酸铵的最佳浓度分别为20~45和11.5 g/L;利用培养基F1进行高密度培养优于其他培养基,工程菌生长符合指数生长曲线,细胞生长延迟期为1.36 h,比生长速率μ为0.4846 h-1.结论:以葡萄糖为碳源,采用葡萄糖-甲醇混合诱导和100%甲醇单一诱导相结合,在菌体鲜重约为280 g/L时连续诱导96 h,菌体生长良好,不会出现自溶,且酶的表达量最高,为摇瓶培养的3倍多,酶活最高可达540 U/mL.
目的:對畢赤嗜甲醇酵母工程菌inu-26高密度培養錶達黑麯黴菊粉內切酶的條件進行優化,找齣最佳的外源蛋白錶達條件.方法:在搖瓶優化培養的基礎上進行髮酵罐高密度培養,優化最佳產酶條件.結果:以葡萄糖為碳源、微量元素添加量100~200 mL/L、甲醇濃度l g/L、pH6.0~7.0、誘導時間96 h時酶的錶達量最高;搖瓶模擬高密度培養錶明影響酵母生長的最主要因素葡萄糖和硫痠銨的最佳濃度分彆為20~45和11.5 g/L;利用培養基F1進行高密度培養優于其他培養基,工程菌生長符閤指數生長麯線,細胞生長延遲期為1.36 h,比生長速率μ為0.4846 h-1.結論:以葡萄糖為碳源,採用葡萄糖-甲醇混閤誘導和100%甲醇單一誘導相結閤,在菌體鮮重約為280 g/L時連續誘導96 h,菌體生長良好,不會齣現自溶,且酶的錶達量最高,為搖瓶培養的3倍多,酶活最高可達540 U/mL.
목적:대필적기갑순효모공정균inu-26고밀도배양표체흑곡매국분내절매적조건진행우화,조출최가적외원단백표체조건.방법:재요병우화배양적기출상진행발효관고밀도배양,우화최가산매조건.결과:이포도당위탄원、미량원소첨가량100~200 mL/L、갑순농도l g/L、pH6.0~7.0、유도시간96 h시매적표체량최고;요병모의고밀도배양표명영향효모생장적최주요인소포도당화류산안적최가농도분별위20~45화11.5 g/L;이용배양기F1진행고밀도배양우우기타배양기,공정균생장부합지수생장곡선,세포생장연지기위1.36 h,비생장속솔μ위0.4846 h-1.결론:이포도당위탄원,채용포도당-갑순혼합유도화100%갑순단일유도상결합,재균체선중약위280 g/L시련속유도96 h,균체생장량호,불회출현자용,차매적표체량최고,위요병배양적3배다,매활최고가체540 U/mL.