CAJ | 학술논문

目的:采用腹腔注射链脲佐菌素+切除双侧卵巢复合方法建立绝经后糖尿病骨质疏松大鼠模型,观察糖尿病骨质疏松大鼠破骨细胞的改变.方法:实验于2003-12/2004-08在河北医科大学第三医院中心实验室完成.①实验材料:选用2.5～3个月龄清洁级雌性Wistar大鼠60只.②实验分组:完全随机设计分为6组:正常对照组、正常假手术组及正常双侧卵巢切除组均为8只;糖尿病对照组、糖尿病假手术组及糖尿病双侧卵巢切除组均为12只.③实验干预:采用链脲佐菌素诱导制备糖尿病大鼠模型1周后,将大鼠麻醉结扎输卵管切除卵巢.假手术组大鼠不作卵巢切除,余操作同去卵巢组.卵巢切除后0,2,4,8周随机选择各组大鼠1只,收集骨髓,进行体外骨髓破骨细胞样细胞的培养.④实验评估:切除双侧卵巢后2,4,8周时测量各组大鼠体质量、血糖;细胞培养7 d后,进行细胞固定和抗酒石酸酸性磷酸酶染色(抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性且细胞核≥3个的细胞认定为破骨细胞样细胞);倒置显微镜计数破骨细胞样细胞数量.结果:制成糖尿病模型及切除卵巢后,3组糖尿病大鼠死亡7只,进入结果分析53只.①各组大鼠血糖和体质量的变化:切除卵巢0,2,4,8周,3组糖尿病大鼠血糖均高于正常组(P＜0.01),体质量均低于正常组(P＜0.01);4周时,正常双侧卵巢切除组体质量高于同期正常对照组和正常假手术组;糖尿病双侧卵巢切除组体质量在2,4,8周时均高于同期糖尿病对照组和糖尿病假手术组(4周P＜0.05,8周P＜0.01).②切除卵巢后各组大鼠体外培养的破骨细胞样细胞形成的变化:糖尿病双侧卵巢切除大鼠破骨细胞多于糖尿病大鼠及正常去卵巢大鼠,且破骨细胞数量随着去卵巢的时间和糖尿病病程延长而增加.③骨髓来源的体外破骨细胞样细胞的形成与血糖、糖尿病病程及去卵巢时间的相关性分析:破骨细胞数量与糖尿病病程呈正相关,而与血糖增高的程度无关(r=-0.537;P=0.109).结论:①卵巢切除对大鼠的血糖无显著影响,对大鼠体质量的影响被糖尿病减弱,在糖尿病早期破骨细胞样细胞的形成已有增加.②破骨细胞形成增加可能是绝经后糖尿病骨质疏松的原因之一. 目的:採用腹腔註射鏈脲佐菌素+切除雙側卵巢複閤方法建立絕經後糖尿病骨質疏鬆大鼠模型,觀察糖尿病骨質疏鬆大鼠破骨細胞的改變.方法:實驗于2003-12/2004-08在河北醫科大學第三醫院中心實驗室完成.①實驗材料:選用2.5～3箇月齡清潔級雌性Wistar大鼠60隻.②實驗分組:完全隨機設計分為6組:正常對照組、正常假手術組及正常雙側卵巢切除組均為8隻;糖尿病對照組、糖尿病假手術組及糖尿病雙側卵巢切除組均為12隻.③實驗榦預:採用鏈脲佐菌素誘導製備糖尿病大鼠模型1週後,將大鼠痳醉結扎輸卵管切除卵巢.假手術組大鼠不作卵巢切除,餘操作同去卵巢組.卵巢切除後0,2,4,8週隨機選擇各組大鼠1隻,收集骨髓,進行體外骨髓破骨細胞樣細胞的培養.④實驗評估:切除雙側卵巢後2,4,8週時測量各組大鼠體質量、血糖;細胞培養7 d後,進行細胞固定和抗酒石痠痠性燐痠酶染色(抗酒石痠痠性燐痠酶染色暘性且細胞覈≥3箇的細胞認定為破骨細胞樣細胞);倒置顯微鏡計數破骨細胞樣細胞數量.結果:製成糖尿病模型及切除卵巢後,3組糖尿病大鼠死亡7隻,進入結果分析53隻.①各組大鼠血糖和體質量的變化:切除卵巢0,2,4,8週,3組糖尿病大鼠血糖均高于正常組(P＜0.01),體質量均低于正常組(P＜0.01);4週時,正常雙側卵巢切除組體質量高于同期正常對照組和正常假手術組;糖尿病雙側卵巢切除組體質量在2,4,8週時均高于同期糖尿病對照組和糖尿病假手術組(4週P＜0.05,8週P＜0.01).②切除卵巢後各組大鼠體外培養的破骨細胞樣細胞形成的變化:糖尿病雙側卵巢切除大鼠破骨細胞多于糖尿病大鼠及正常去卵巢大鼠,且破骨細胞數量隨著去卵巢的時間和糖尿病病程延長而增加.③骨髓來源的體外破骨細胞樣細胞的形成與血糖、糖尿病病程及去卵巢時間的相關性分析:破骨細胞數量與糖尿病病程呈正相關,而與血糖增高的程度無關(r=-0.537;P=0.109).結論:①卵巢切除對大鼠的血糖無顯著影響,對大鼠體質量的影響被糖尿病減弱,在糖尿病早期破骨細胞樣細胞的形成已有增加.②破骨細胞形成增加可能是絕經後糖尿病骨質疏鬆的原因之一.
목적:채용복강주사련뇨좌균소+절제쌍측란소복합방법건립절경후당뇨병골질소송대서모형,관찰당뇨병골질소송대서파골세포적개변.방법:실험우2003-12/2004-08재하북의과대학제삼의원중심실험실완성.①실험재료:선용2.5～3개월령청길급자성Wistar대서60지.②실험분조:완전수궤설계분위6조:정상대조조、정상가수술조급정상쌍측란소절제조균위8지;당뇨병대조조、당뇨병가수술조급당뇨병쌍측란소절제조균위12지.③실험간예:채용련뇨좌균소유도제비당뇨병대서모형1주후,장대서마취결찰수란관절제란소.가수술조대서불작란소절제,여조작동거란소조.란소절제후0,2,4,8주수궤선택각조대서1지,수집골수,진행체외골수파골세포양세포적배양.④실험평고:절제쌍측란소후2,4,8주시측량각조대서체질량、혈당;세포배양7 d후,진행세포고정화항주석산산성린산매염색(항주석산산성린산매염색양성차세포핵≥3개적세포인정위파골세포양세포);도치현미경계수파골세포양세포수량.결과:제성당뇨병모형급절제란소후,3조당뇨병대서사망7지,진입결과분석53지.①각조대서혈당화체질량적변화:절제란소0,2,4,8주,3조당뇨병대서혈당균고우정상조(P＜0.01),체질량균저우정상조(P＜0.01);4주시,정상쌍측란소절제조체질량고우동기정상대조조화정상가수술조;당뇨병쌍측란소절제조체질량재2,4,8주시균고우동기당뇨병대조조화당뇨병가수술조(4주P＜0.05,8주P＜0.01).②절제란소후각조대서체외배양적파골세포양세포형성적변화:당뇨병쌍측란소절제대서파골세포다우당뇨병대서급정상거란소대서,차파골세포수량수착거란소적시간화당뇨병병정연장이증가.③골수래원적체외파골세포양세포적형성여혈당、당뇨병병정급거란소시간적상관성분석:파골세포수량여당뇨병병정정정상관,이여혈당증고적정도무관(r=-0.537;P=0.109).결론:①란소절제대대서적혈당무현저영향,대대서체질량적영향피당뇨병감약,재당뇨병조기파골세포양세포적형성이유증가.②파골세포형성증가가능시절경후당뇨병골질소송적원인지일.