海洋学报(中文版)
海洋學報(中文版)
해양학보(중문판)
ACTA OCEANOLOGICA SINICA
2008年
6期
132-139
,共8页
孙宁波%隋正红%包振民%张冬宝
孫寧波%隋正紅%包振民%張鼕寶
손저파%수정홍%포진민%장동보
赤潮异弯藻%共生甲藻%亚历山大藻%多克隆抗体%酶联免疫检测%荧光免疫检测
赤潮異彎藻%共生甲藻%亞歷山大藻%多剋隆抗體%酶聯免疫檢測%熒光免疫檢測
적조이만조%공생갑조%아력산대조%다극륭항체%매련면역검측%형광면역검측
为探索和建立免疫学结合荧光技术对赤潮生物的定性、定量检测,制备了3种粒径不同的赤潮藻--赤潮异弯藻(Heterosigma akashiwo)、共生甲藻(Symbiodinium sp)、链状亚历山大藻(Alexandrium catenella)的多克隆抗体,并采用封闭吸附处理以提高抗体的特异性;采用间接酶联免疫法检测了抗体的效价;结果表明未经吸附处理的赤潮异弯藻、共生甲藻的效价分别为1∶41 000,1∶18 000以上,显示是高亲合力的抗体;链状亚历山大藻抗体的效价达到1∶3 500,相比另两种藻的效价较低;吸附处理后的3种多克隆抗体的特异性明显提高,而效价有所下降.3种多克隆抗体与各自藻细胞均有很强的结合力,赤潮异弯藻和共生甲藻的荧光信号均匀分布于细胞表面,链状亚历山大藻细胞的荧光信号在细胞表面分布不均匀,主要集中在腹部横沟内.制备的多克隆抗体只与自身藻细胞结合,与另外2种藻细胞无交叉反应.链状亚历山大藻抗体只与自身藻细胞结合,与塔马亚历山大藻无交叉反应,可作为同属内不同种的鉴别.结合了免疫学和荧光技术,具有特异、灵敏、直观和简便的优点,并且费用低,对于开拓赤潮准确定性、定量检测方法和技术具有重要价值.
為探索和建立免疫學結閤熒光技術對赤潮生物的定性、定量檢測,製備瞭3種粒徑不同的赤潮藻--赤潮異彎藻(Heterosigma akashiwo)、共生甲藻(Symbiodinium sp)、鏈狀亞歷山大藻(Alexandrium catenella)的多剋隆抗體,併採用封閉吸附處理以提高抗體的特異性;採用間接酶聯免疫法檢測瞭抗體的效價;結果錶明未經吸附處理的赤潮異彎藻、共生甲藻的效價分彆為1∶41 000,1∶18 000以上,顯示是高親閤力的抗體;鏈狀亞歷山大藻抗體的效價達到1∶3 500,相比另兩種藻的效價較低;吸附處理後的3種多剋隆抗體的特異性明顯提高,而效價有所下降.3種多剋隆抗體與各自藻細胞均有很彊的結閤力,赤潮異彎藻和共生甲藻的熒光信號均勻分佈于細胞錶麵,鏈狀亞歷山大藻細胞的熒光信號在細胞錶麵分佈不均勻,主要集中在腹部橫溝內.製備的多剋隆抗體隻與自身藻細胞結閤,與另外2種藻細胞無交扠反應.鏈狀亞歷山大藻抗體隻與自身藻細胞結閤,與塔馬亞歷山大藻無交扠反應,可作為同屬內不同種的鑒彆.結閤瞭免疫學和熒光技術,具有特異、靈敏、直觀和簡便的優點,併且費用低,對于開拓赤潮準確定性、定量檢測方法和技術具有重要價值.
위탐색화건립면역학결합형광기술대적조생물적정성、정량검측,제비료3충립경불동적적조조--적조이만조(Heterosigma akashiwo)、공생갑조(Symbiodinium sp)、련상아력산대조(Alexandrium catenella)적다극륭항체,병채용봉폐흡부처리이제고항체적특이성;채용간접매련면역법검측료항체적효개;결과표명미경흡부처리적적조이만조、공생갑조적효개분별위1∶41 000,1∶18 000이상,현시시고친합력적항체;련상아력산대조항체적효개체도1∶3 500,상비령량충조적효개교저;흡부처리후적3충다극륭항체적특이성명현제고,이효개유소하강.3충다극륭항체여각자조세포균유흔강적결합력,적조이만조화공생갑조적형광신호균균분포우세포표면,련상아력산대조세포적형광신호재세포표면분포불균균,주요집중재복부횡구내.제비적다극륭항체지여자신조세포결합,여령외2충조세포무교차반응.련상아력산대조항체지여자신조세포결합,여탑마아력산대조무교차반응,가작위동속내불동충적감별.결합료면역학화형광기술,구유특이、령민、직관화간편적우점,병차비용저,대우개탁적조준학정성、정량검측방법화기술구유중요개치.