鸡IL-18成熟蛋白基因变构体毕赤酵母表达载体的构建及表达
계IL-18성숙단백기인변구체필적효모표체재체적구건급표체
Construction and expression of a site-specific mutant of chicken interleukin-18gene in Pichia pastoris
  • 万方数据
    中国兽医学报 중국수의학보
    CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
    2009年 4期 502-506 ,共5页

    刘一尘%张春杰%程安春%程相朝%汪铭书%李银聚%吴庭才%易明林

    류일진%장춘걸%정안춘%정상조%왕명서%리은취%오정재%역명림

    鸡IL-18%定点突变%毕赤酵母表达系统%SDS-PAGE%Western-blot 鷄IL-18%定點突變%畢赤酵母錶達繫統%SDS-PAGE%Western-blot
    계IL-18%정점돌변%필적효모표체계통%SDS-PAGE%Western-blot
    为使鸡IL-18成熟蛋白基因在真核系统中高效表达,对其进行定点突变,将酵母低频密码子突变为偏嗜性密码子,构建了鸡IL-18成熟蛋白变构基因真核重组表达载体pPICZαA-MChIL18*,并将其转化入P.pastoris X-33.重组菌株X-33/pPICZαA-MChIL18*经甲醇诱导后,表达产物的上清液经SDS-PAGE检测,结果在约23 000处有目的条带,与预期的相对分子质量一致,占总蛋白的45%,对其进行Western-blot检测,结果与兔抗鸡IL-18多克隆抗体发生特异性免疫反应.结果表明,鸡IL-18成熟蛋白变构基因在毕赤酵母中成功的进行了表达.
    위사계IL-18성숙단백기인재진핵계통중고효표체,대기진행정점돌변,장효모저빈밀마자돌변위편기성밀마자,구건료계IL-18성숙단백변구기인진핵중조표체재체pPICZαA-MChIL18*,병장기전화입P.pastoris X-33.중조균주X-33/pPICZαA-MChIL18*경갑순유도후,표체산물적상청액경SDS-PAGE검측,결과재약23 000처유목적조대,여예기적상대분자질량일치,점총단백적45%,대기진행Western-blot검측,결과여토항계IL-18다극륭항체발생특이성면역반응.결과표명,계IL-18성숙단백변구기인재필적효모중성공적진행료표체.
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