生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2010年
3期
131-134
,共4页
李国娟%柳纪省%李宝玉%娄忠子%田永强
李國娟%柳紀省%李寶玉%婁忠子%田永彊
리국연%류기성%리보옥%루충자%전영강
猪繁殖与呼吸综合征%ORF5基因%原核表达
豬繁殖與呼吸綜閤徵%ORF5基因%原覈錶達
저번식여호흡종합정%ORF5기인%원핵표체
Porcine reproductive and respiratory syndrome%Gene ORF5%Prokaryotic expression
通过PCR方法从重组质粒pGEM-ORF5扩增得到缺失N端疏水序列的基因片段dORF5(deleting ORF5).将dORF5 克隆至原核高效表达载体pGEX-4T-1 ,在E.coli Rosetta细胞中成功表达了重组蛋白GST-dORF5 .用Western blotting鉴定表达蛋白,证明dORF5基因得到表达.本试验得到的重组蛋白,为进一步研究PRRS 病毒结构蛋白的结构和功能奠定了基础.
通過PCR方法從重組質粒pGEM-ORF5擴增得到缺失N耑疏水序列的基因片段dORF5(deleting ORF5).將dORF5 剋隆至原覈高效錶達載體pGEX-4T-1 ,在E.coli Rosetta細胞中成功錶達瞭重組蛋白GST-dORF5 .用Western blotting鑒定錶達蛋白,證明dORF5基因得到錶達.本試驗得到的重組蛋白,為進一步研究PRRS 病毒結構蛋白的結構和功能奠定瞭基礎.
통과PCR방법종중조질립pGEM-ORF5확증득도결실N단소수서렬적기인편단dORF5(deleting ORF5).장dORF5 극륭지원핵고효표체재체pGEX-4T-1 ,재E.coli Rosetta세포중성공표체료중조단백GST-dORF5 .용Western blotting감정표체단백,증명dORF5기인득도표체.본시험득도적중조단백,위진일보연구PRRS 병독결구단백적결구화공능전정료기출.
The truncated ORF5 gene segments of PRRS which deleted hydrophobic N-terminal sequence,amplified from recombinant plasmids p-GEM-ORF5 and were cloned into prokaryotic expression vector pGEX- 4T-1.The recombinant proteins GST-dORF5 were highly expressed in Escherichia coli Rosetta.Western blotting analysis showed the recombinant protein could react with antibody.The result provided fundamental data and materials for the further study on the structure and function of GP5 protein of PRRSV.
