临床血清循环miRNAs定量技术的建立
림상혈청순배miRNAs정량기술적건립
Establishment of platform for quantifying circulating miRNAs in clinical serum samples
  • 万方数据
    军医进修学院学报 군의진수학원학보
    ACADEMIC JOURNAL OF PLA POSTGRADUATE MEDICAL SCHOOL
    2010年 4期 363-366 ,共4页

    桂俊豪%田亚平%温新宇%邓心新%董振南%贾兴旺%高静%闰玮%田丽媛

    계준호%전아평%온신우%산심신%동진남%가흥왕%고정%윤위%전려원

    血清%循环miRNAs%实时荧光定量PCR 血清%循環miRNAs%實時熒光定量PCR
    혈청%순배miRNAs%실시형광정량PCR
    目的 建立可靠的临床血清(浆)循环miRNAs定量技术.方法 常规收集血清(浆)标本,mirVana PARIS试剂盒法抽提血清(浆)总RNA,采用Dnase I消化总RNA提取液,以miRNAs特异性茎-环引物引导反转录,通过TaqMan实时荧光定量PCR对U6及靶miRNAs进行检测.结果 10份新鲜血浆总RNA浓度介于3.5～35.4ng/μl之间.对常规收集的400μlI临床血清标本中U6、miR-16、miR-224均能实现特异扩增及定最,相应的平均Ct值约为30、25及32.6份不同留置时间血清标本总RNA浓度分别10.24和4.46ng/μl,定量PCR结果显示其中相应miR-16和miR-224的丰度却相对稳定.结论 血清(浆)总RNA抽提及循环miRNAs定量切实可行.
    목적 건립가고적림상혈청(장)순배miRNAs정량기술.방법 상규수집혈청(장)표본,mirVana PARIS시제합법추제혈청(장)총RNA,채용Dnase I소화총RNA제취액,이miRNAs특이성경-배인물인도반전록,통과TaqMan실시형광정량PCR대U6급파miRNAs진행검측.결과 10빈신선혈장총RNA농도개우3.5～35.4ng/μl지간.대상규수집적400μlI림상혈청표본중U6、miR-16、miR-224균능실현특이확증급정최,상응적평균Ct치약위30、25급32.6빈불동류치시간혈청표본총RNA농도분별10.24화4.46ng/μl,정량PCR결과현시기중상응miR-16화miR-224적봉도각상대은정.결론 혈청(장)총RNA추제급순배miRNAs정량절실가행.
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