中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2010年
4期
356-359
,共4页
陈姗%马长玲%高志岩%麦璟莹%赵晶晶%朱郇悯%李小敏%李孜
陳姍%馬長玲%高誌巖%麥璟瑩%趙晶晶%硃郇憫%李小敏%李孜
진산%마장령%고지암%맥경형%조정정%주순민%리소민%리자
日本血吸虫%SjTβRII%克隆%基因表达
日本血吸蟲%SjTβRII%剋隆%基因錶達
일본혈흡충%SjTβRII%극륭%기인표체
目的 获得日本血吸虫TGF-β受体II(TβRII)样基因的cDNA 完整序列,克隆、原核表达其胞外段蛋白序列,并进行初步免疫学分析.方法 应用RACE方法获得SjTβRII样基因cDNA全长序列,构建其胞外段(即N端)原核表达载体,在大肠埃希菌中IPTG诱导表达,表达产物行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析.纯化重组蛋白并免疫大鼠制备抗血清,应用Western Blotting方法初步鉴定重组蛋白.结果 获得日本血吸虫SjTβRII样基因的cDNA全长序列,为2 283bp,编码760个氨基酸,其中胞外段长531bp,编码177个氨基酸.构建的重组质粒在大肠埃希菌中成功表达,经亲和层析获得了高纯度蛋白.重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清识别,表明其具有免疫原性和抗原性.结论 首次获得日本血吸虫TβRII样基因的cDNA全长序列,其胞外段可在原核表达系统中获得具有免疫原性和抗原性的高效表达,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础.
目的 穫得日本血吸蟲TGF-β受體II(TβRII)樣基因的cDNA 完整序列,剋隆、原覈錶達其胞外段蛋白序列,併進行初步免疫學分析.方法 應用RACE方法穫得SjTβRII樣基因cDNA全長序列,構建其胞外段(即N耑)原覈錶達載體,在大腸埃希菌中IPTG誘導錶達,錶達產物行十二烷基硫痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)分析.純化重組蛋白併免疫大鼠製備抗血清,應用Western Blotting方法初步鑒定重組蛋白.結果 穫得日本血吸蟲SjTβRII樣基因的cDNA全長序列,為2 283bp,編碼760箇氨基痠,其中胞外段長531bp,編碼177箇氨基痠.構建的重組質粒在大腸埃希菌中成功錶達,經親和層析穫得瞭高純度蛋白.重組蛋白可被其免疫的SD大鼠血清識彆,錶明其具有免疫原性和抗原性.結論 首次穫得日本血吸蟲TβRII樣基因的cDNA全長序列,其胞外段可在原覈錶達繫統中穫得具有免疫原性和抗原性的高效錶達,為進一步研究該蛋白的功能奠定瞭基礎.
목적 획득일본혈흡충TGF-β수체II(TβRII)양기인적cDNA 완정서렬,극륭、원핵표체기포외단단백서렬,병진행초보면역학분석.방법 응용RACE방법획득SjTβRII양기인cDNA전장서렬,구건기포외단(즉N단)원핵표체재체,재대장애희균중IPTG유도표체,표체산물행십이완기류산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)분석.순화중조단백병면역대서제비항혈청,응용Western Blotting방법초보감정중조단백.결과 획득일본혈흡충SjTβRII양기인적cDNA전장서렬,위2 283bp,편마760개안기산,기중포외단장531bp,편마177개안기산.구건적중조질립재대장애희균중성공표체,경친화층석획득료고순도단백.중조단백가피기면역적SD대서혈청식별,표명기구유면역원성화항원성.결론 수차획득일본혈흡충TβRII양기인적cDNA전장서렬,기포외단가재원핵표체계통중획득구유면역원성화항원성적고효표체,위진일보연구해단백적공능전정료기출.
