CAJ | 학술논문

目的:观察缺血后处理中心肌细胞内源性细胞色素P450表氧化酶2J3/环氧二十碳三烯酸系统(CYP2J3/EETs)对心肌细胞凋亡的调节作用机制.方法:取Wistar乳鼠(12-24 h)心脏做原代心肌细胞培养.实验分为7组:对照组、缺氧/复氧组、缺氧后处理组、CYP2J3转染组、空质粒组、6-(2-炔丙基氧苯基)己酸(PPOH,一种CYP2J3抑制剂)组、二甲基亚砜(DMSO)溶剂组.除对照组外,其它各组均进行缺氧/复氧处理.用MTT法检测心肌细胞活力,高压液相色谱法检测心肌细胞培养液中11,12 - EET浓度,Western blotting检测心肌细胞中caspase-3蛋白的表达,caspase-3活性检测试剂盒检测caspase-3蛋白的活性.结果:缺氧后处理组心肌细胞活力和11,12 - EET浓度明显高于缺氧/复氧组(P<0.01),CYP2J3转染组比后处理组明显增高(P<0.01),PPOH组比后处理组明显下降(P<0.01).后处理组caspase-3蛋白的表达及活性低于缺氧/复氧组(P<0.01),CYP2J3转染组caspase-3 蛋白表达及活性低于后处理(P<0.01),而PPOH组caspase-3蛋白表达及活性高于缺氧后处理组(P<0.01).结论:在缺氧后处理中CYP2J3/EETs可能通过抑制caspase-3蛋白的表达及活性来影响细胞凋亡,从而对心肌起保护作用.
목적:관찰결혈후처리중심기세포내원성세포색소P450표양화매2J3/배양이십탄삼희산계통(CYP2J3/EETs)대심기세포조망적조절작용궤제.방법:취Wistar유서(12-24 h)심장주원대심기세포배양.실험분위7조:대조조、결양/복양조、결양후처리조、CYP2J3전염조、공질립조、6-(2-결병기양분기)기산(PPOH,일충CYP2J3억제제)조、이갑기아풍(DMSO)용제조.제대조조외,기타각조균진행결양/복양처리.용MTT법검측심기세포활력,고압액상색보법검측심기세포배양액중11,12 - EET농도,Western blotting검측심기세포중caspase-3단백적표체,caspase-3활성검측시제합검측caspase-3단백적활성.결과:결양후처리조심기세포활력화11,12 - EET농도명현고우결양/복양조(P<0.01),CYP2J3전염조비후처리조명현증고(P<0.01),PPOH조비후처리조명현하강(P<0.01).후처리조caspase-3단백적표체급활성저우결양/복양조(P<0.01),CYP2J3전염조caspase-3 단백표체급활성저우후처리(P<0.01),이PPOH조caspase-3단백표체급활성고우결양후처리조(P<0.01).결론:재결양후처리중CYP2J3/EETs가능통과억제caspase-3단백적표체급활성래영향세포조망,종이대심기기보호작용.