泸州医学院学报
瀘州醫學院學報
로주의학원학보
JOURNAL OF LUZHOU MEDICAL COLLEGE
2012年
3期
241-244
,共4页
梅志强%张连美%于海清%段承刚%杨曼曼%傅俊江
梅誌彊%張連美%于海清%段承剛%楊曼曼%傅俊江
매지강%장련미%우해청%단승강%양만만%부준강
菌落%PCK%改良%TRIM28
菌落%PCK%改良%TRIM28
균락%PCK%개량%TRIM28
目的:建立简便、可靠基因克隆菌落阳性重组子的筛选方法.方法:应用普通菌落PCR和改良的菌落PCR方法对TRIM28基因的阳性重组体进行阳性重组子的分析比较,同时探讨了PCR反应体系中模板浓度和DMSO对于扩增效率的影响.并对鉴定结果为阳性的克隆进行了进一步酶切和蛋白诱导表达分析.结果:运用改良的菌落PCR法简单快捷,结果可靠,反应体系中DMSO的浓度为4%左右可以很好地促进GC富集DNA模板的PCR扩增.其方法的可靠性得到了酶切验证和重组蛋白表达证实.结论:应用改良方法可以用于快速有效地筛选阳性重组菌落.
目的:建立簡便、可靠基因剋隆菌落暘性重組子的篩選方法.方法:應用普通菌落PCR和改良的菌落PCR方法對TRIM28基因的暘性重組體進行暘性重組子的分析比較,同時探討瞭PCR反應體繫中模闆濃度和DMSO對于擴增效率的影響.併對鑒定結果為暘性的剋隆進行瞭進一步酶切和蛋白誘導錶達分析.結果:運用改良的菌落PCR法簡單快捷,結果可靠,反應體繫中DMSO的濃度為4%左右可以很好地促進GC富集DNA模闆的PCR擴增.其方法的可靠性得到瞭酶切驗證和重組蛋白錶達證實.結論:應用改良方法可以用于快速有效地篩選暘性重組菌落.
목적:건립간편、가고기인극륭균락양성중조자적사선방법.방법:응용보통균락PCR화개량적균락PCR방법대TRIM28기인적양성중조체진행양성중조자적분석비교,동시탐토료PCR반응체계중모판농도화DMSO대우확증효솔적영향.병대감정결과위양성적극륭진행료진일보매절화단백유도표체분석.결과:운용개량적균락PCR법간단쾌첩,결과가고,반응체계중DMSO적농도위4%좌우가이흔호지촉진GC부집DNA모판적PCR확증.기방법적가고성득도료매절험증화중조단백표체증실.결론:응용개량방법가이용우쾌속유효지사선양성중조균락.
