肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2012年
7期
489-494
,共6页
危敏%姜立%王妮莎%马文丽
危敏%薑立%王妮莎%馬文麗
위민%강립%왕니사%마문려
白血病,髓样%水通道蛋白1%基因表达%细胞分化%细胞增殖%K562细胞
白血病,髓樣%水通道蛋白1%基因錶達%細胞分化%細胞增殖%K562細胞
백혈병,수양%수통도단백1%기인표체%세포분화%세포증식%K562세포
目的:探讨水通道蛋白1(aquaporin-1,AQP1)过表达对人慢性髓细胞白血病(chronic myeloidleukemia,CML) K562细胞红系分化和增殖的影响.方法:以人脑cDNA文库为模板,通过PCR扩增出AQP1基因的编码序列,构建pBABE-puro-AQP1真核表达载体；感染K562细胞,筛选建立稳定过表达AQP1基因的K562细胞株(命名为K562-AQP1)；实时荧光定量PCR法、细胞免疫荧光染色法及蛋白质印迹法分别检测AQP1转录和蛋白表达水平.通过MTT法检测细胞生长增殖、实时荧光定量PCR法检测γ珠蛋白表达和分光光度法检测血红蛋白含量,研究AQP1过表达对K562细胞红系分化和增殖的影响.结果:与空载体对照组相比,pBABE-puro-AQP1转染入K562细胞后AQP1 mRNA和蛋白表达水平皆有显著升高(P＜0.01),K562-AQP1细胞中红系分化指标γ珠蛋白和血红蛋白表达水平明显增加,同时细胞生长速度明显降低(P＜0.05).结论:AQP1过表达可以显著促进K562细胞向红系分化,同时抑制细胞增殖.推测AQP1可能成为临床诱导分化治疗CML的基因靶点之一.
目的:探討水通道蛋白1(aquaporin-1,AQP1)過錶達對人慢性髓細胞白血病(chronic myeloidleukemia,CML) K562細胞紅繫分化和增殖的影響.方法:以人腦cDNA文庫為模闆,通過PCR擴增齣AQP1基因的編碼序列,構建pBABE-puro-AQP1真覈錶達載體；感染K562細胞,篩選建立穩定過錶達AQP1基因的K562細胞株(命名為K562-AQP1)；實時熒光定量PCR法、細胞免疫熒光染色法及蛋白質印跡法分彆檢測AQP1轉錄和蛋白錶達水平.通過MTT法檢測細胞生長增殖、實時熒光定量PCR法檢測γ珠蛋白錶達和分光光度法檢測血紅蛋白含量,研究AQP1過錶達對K562細胞紅繫分化和增殖的影響.結果:與空載體對照組相比,pBABE-puro-AQP1轉染入K562細胞後AQP1 mRNA和蛋白錶達水平皆有顯著升高(P＜0.01),K562-AQP1細胞中紅繫分化指標γ珠蛋白和血紅蛋白錶達水平明顯增加,同時細胞生長速度明顯降低(P＜0.05).結論:AQP1過錶達可以顯著促進K562細胞嚮紅繫分化,同時抑製細胞增殖.推測AQP1可能成為臨床誘導分化治療CML的基因靶點之一.
목적:탐토수통도단백1(aquaporin-1,AQP1)과표체대인만성수세포백혈병(chronic myeloidleukemia,CML) K562세포홍계분화화증식적영향.방법:이인뇌cDNA문고위모판,통과PCR확증출AQP1기인적편마서렬,구건pBABE-puro-AQP1진핵표체재체；감염K562세포,사선건립은정과표체AQP1기인적K562세포주(명명위K562-AQP1)；실시형광정량PCR법、세포면역형광염색법급단백질인적법분별검측AQP1전록화단백표체수평.통과MTT법검측세포생장증식、실시형광정량PCR법검측γ주단백표체화분광광도법검측혈홍단백함량,연구AQP1과표체대K562세포홍계분화화증식적영향.결과:여공재체대조조상비,pBABE-puro-AQP1전염입K562세포후AQP1 mRNA화단백표체수평개유현저승고(P＜0.01),K562-AQP1세포중홍계분화지표γ주단백화혈홍단백표체수평명현증가,동시세포생장속도명현강저(P＜0.05).결론:AQP1과표체가이현저촉진K562세포향홍계분화,동시억제세포증식.추측AQP1가능성위림상유도분화치료CML적기인파점지일.
