中华肝脏病杂志
中華肝髒病雜誌
중화간장병잡지
CHINESE JOURNAL OF HEPATOLOGY
2010年
5期
342-345
,共4页
冯海娟%朱净%潘亮%陆静贤%肖明兵%黄华%倪润洲%陆翠华
馮海娟%硃淨%潘亮%陸靜賢%肖明兵%黃華%倪潤洲%陸翠華
풍해연%주정%반량%륙정현%초명병%황화%예윤주%륙취화
肝硬化%瘦素%大鼠%模型,动物
肝硬化%瘦素%大鼠%模型,動物
간경화%수소%대서%모형,동물
Liver corrhosis%Leptin%Rats%Models,animal
目的 研究针对大鼠瘦素基因的小干扰(si)RNA对肝纤维化的治疗效果.方法 将40只雄性SD大鼠平均分为4组,正常对照组皮下注射橄榄油溶液3 ml/kg,2次/周,共6周;肝纤维化模型组皮下注射60% CCl4 3 ml/kg,2次/周,共6周;siRNA治疗组和阴性对照组均于皮下注射60% CCl4 3 ml/kg,2周后尾静脉分别注射siRNA或阴性对照质粒0.2 mg/kg.每周测体质量1次,根据体质量调整药物用量.设计针对瘦素mRNA的siRNA,并构建其表达载体;用脂质体方法通过尾静脉注射转染入CCl4诱导的肝纤维化大鼠体内,然后分别采用逆转录-聚合酶链反应、免疫组织化学方法检测瘦素与Ⅰ、Ⅲ型胶原在肝脏组织中的表达.免疫组织化学资料采用等级资料秩和检验.PCR结果采用单因素方差分析进行统计学处理,P＜0.05时用SNK法进行多重比较.结果 瘦素mRNA在正常对照组组、肝纤维化模型组、siRNA治疗组和阴性对照组的相对表达量分别为0.75±0.03、2.34±0.14、0.90±0.06、2.31±0.13,各组比较,F=797.64,P=0.000,差异有统计学意义;Ⅰ型胶原mRNA在各组的相对表达量分别为1.10±0.11、2.75±0.13、1.27±0.08、2.77±0.12,各组比较,F=695.71,P=0.000,差异有统计学意义;Ⅲ型胶原mRNA在各组的相对表达量分别为0.62±0.07、1.52±0.09、0.85±0.08、1.51±0.07,各组比较,F=371.57,P=0.000,差异有统计学意义.结论 针对瘦素基因的siRNA对肝纤维化有明显的治疗作用.
目的 研究針對大鼠瘦素基因的小榦擾(si)RNA對肝纖維化的治療效果.方法 將40隻雄性SD大鼠平均分為4組,正常對照組皮下註射橄欖油溶液3 ml/kg,2次/週,共6週;肝纖維化模型組皮下註射60% CCl4 3 ml/kg,2次/週,共6週;siRNA治療組和陰性對照組均于皮下註射60% CCl4 3 ml/kg,2週後尾靜脈分彆註射siRNA或陰性對照質粒0.2 mg/kg.每週測體質量1次,根據體質量調整藥物用量.設計針對瘦素mRNA的siRNA,併構建其錶達載體;用脂質體方法通過尾靜脈註射轉染入CCl4誘導的肝纖維化大鼠體內,然後分彆採用逆轉錄-聚閤酶鏈反應、免疫組織化學方法檢測瘦素與Ⅰ、Ⅲ型膠原在肝髒組織中的錶達.免疫組織化學資料採用等級資料秩和檢驗.PCR結果採用單因素方差分析進行統計學處理,P＜0.05時用SNK法進行多重比較.結果 瘦素mRNA在正常對照組組、肝纖維化模型組、siRNA治療組和陰性對照組的相對錶達量分彆為0.75±0.03、2.34±0.14、0.90±0.06、2.31±0.13,各組比較,F=797.64,P=0.000,差異有統計學意義;Ⅰ型膠原mRNA在各組的相對錶達量分彆為1.10±0.11、2.75±0.13、1.27±0.08、2.77±0.12,各組比較,F=695.71,P=0.000,差異有統計學意義;Ⅲ型膠原mRNA在各組的相對錶達量分彆為0.62±0.07、1.52±0.09、0.85±0.08、1.51±0.07,各組比較,F=371.57,P=0.000,差異有統計學意義.結論 針對瘦素基因的siRNA對肝纖維化有明顯的治療作用.
목적 연구침대대서수소기인적소간우(si)RNA대간섬유화적치료효과.방법 장40지웅성SD대서평균분위4조,정상대조조피하주사감람유용액3 ml/kg,2차/주,공6주;간섬유화모형조피하주사60% CCl4 3 ml/kg,2차/주,공6주;siRNA치료조화음성대조조균우피하주사60% CCl4 3 ml/kg,2주후미정맥분별주사siRNA혹음성대조질립0.2 mg/kg.매주측체질량1차,근거체질량조정약물용량.설계침대수소mRNA적siRNA,병구건기표체재체;용지질체방법통과미정맥주사전염입CCl4유도적간섬유화대서체내,연후분별채용역전록-취합매련반응、면역조직화학방법검측수소여Ⅰ、Ⅲ형효원재간장조직중적표체.면역조직화학자료채용등급자료질화검험.PCR결과채용단인소방차분석진행통계학처리,P＜0.05시용SNK법진행다중비교.결과 수소mRNA재정상대조조조、간섬유화모형조、siRNA치료조화음성대조조적상대표체량분별위0.75±0.03、2.34±0.14、0.90±0.06、2.31±0.13,각조비교,F=797.64,P=0.000,차이유통계학의의;Ⅰ형효원mRNA재각조적상대표체량분별위1.10±0.11、2.75±0.13、1.27±0.08、2.77±0.12,각조비교,F=695.71,P=0.000,차이유통계학의의;Ⅲ형효원mRNA재각조적상대표체량분별위0.62±0.07、1.52±0.09、0.85±0.08、1.51±0.07,각조비교,F=371.57,P=0.000,차이유통계학의의.결론 침대수소기인적siRNA대간섬유화유명현적치료작용.
Objective To study the effects of decreased leptin expression on liver fibrosis. Methods The small interfering RNA, targeting leptin gene, was designed according to the secondary structure of leptin gene. The recombinant plasmids were encapsulated with lipofectamin and then injected into carbon tetrachloride (CCl4) induced rat liver fibrosis models. Leptin and Ⅰ, Ⅲ collage were detected by immunohistochemistry and reverse transcription polymerase chain reaction (RT- PCR). Results The mRNA and protein levels of leptin in the fibrotic liver transfected with leptin shRNA were significantly decreased compared with those in controls (P ＜ 0.01).The depositions of type Ⅰ and type Ⅲ collagens were also decreased (P ＜ 0.01). Conclusion Decreased leptin expression prevents liver fibrosis.
