中国普通外科杂志
中國普通外科雜誌
중국보통외과잡지
CHINESE JOURNAL OF GENERAL SURGERY
2007年
2期
141-144
,共4页
李宝金%张超%宁长青%伊远学%郝颖%刘晓平%区庆嘉
李寶金%張超%寧長青%伊遠學%郝穎%劉曉平%區慶嘉
리보금%장초%저장청%이원학%학영%류효평%구경가
内皮,血管%KDR启动子%胸苷激酶
內皮,血管%KDR啟動子%胸苷激酶
내피,혈관%KDR계동자%흉감격매
目的 构建含以KDR为启动子的HSV-tk重组腺病毒,体外评估其对血管内皮细胞的特异性杀伤效能.方法 采用pAdeasy系统,构建受KDR启动子或巨细胞病毒(CMV)启动子调控并可表达HSV-tk基因的AdKDR-tk和AdCMV-tk,在293细胞中包装、扩增后,体外分别感染表达KDR的人脐静脉血管内皮细胞系(HUVEC)和不表达KDR的肝癌细胞系HepG2,用丙氧鸟苷(GCV)处理受染细胞,并以MTT法检测其细胞增殖情况.结果 病毒滴度均为1×1010 pfu/mL.在感染复数(M0I)为100的条件下,当细胞培养液中加入的GCV浓度由0增至50 μg/mL时,感染含AdKDR-tk的HUVEC细胞和HepG2细胞其存活率由100%分别下降至(28.94±5.67)%和(75.45±2.91)%(P＜0.01),而感染含AdCMV-tk的HUVEC细胞和HepG2细胞其存活率分别下降至(17.56±2.48)%和(23.15±5.72)%(P＞0.05).结论 KDR启动子介导的HSV-tk具有特异性杀伤血管内皮细胞的作用.
目的 構建含以KDR為啟動子的HSV-tk重組腺病毒,體外評估其對血管內皮細胞的特異性殺傷效能.方法 採用pAdeasy繫統,構建受KDR啟動子或巨細胞病毒(CMV)啟動子調控併可錶達HSV-tk基因的AdKDR-tk和AdCMV-tk,在293細胞中包裝、擴增後,體外分彆感染錶達KDR的人臍靜脈血管內皮細胞繫(HUVEC)和不錶達KDR的肝癌細胞繫HepG2,用丙氧鳥苷(GCV)處理受染細胞,併以MTT法檢測其細胞增殖情況.結果 病毒滴度均為1×1010 pfu/mL.在感染複數(M0I)為100的條件下,噹細胞培養液中加入的GCV濃度由0增至50 μg/mL時,感染含AdKDR-tk的HUVEC細胞和HepG2細胞其存活率由100%分彆下降至(28.94±5.67)%和(75.45±2.91)%(P＜0.01),而感染含AdCMV-tk的HUVEC細胞和HepG2細胞其存活率分彆下降至(17.56±2.48)%和(23.15±5.72)%(P＞0.05).結論 KDR啟動子介導的HSV-tk具有特異性殺傷血管內皮細胞的作用.
목적 구건함이KDR위계동자적HSV-tk중조선병독,체외평고기대혈관내피세포적특이성살상효능.방법 채용pAdeasy계통,구건수KDR계동자혹거세포병독(CMV)계동자조공병가표체HSV-tk기인적AdKDR-tk화AdCMV-tk,재293세포중포장、확증후,체외분별감염표체KDR적인제정맥혈관내피세포계(HUVEC)화불표체KDR적간암세포계HepG2,용병양조감(GCV)처리수염세포,병이MTT법검측기세포증식정황.결과 병독적도균위1×1010 pfu/mL.재감염복수(M0I)위100적조건하,당세포배양액중가입적GCV농도유0증지50 μg/mL시,감염함AdKDR-tk적HUVEC세포화HepG2세포기존활솔유100%분별하강지(28.94±5.67)%화(75.45±2.91)%(P＜0.01),이감염함AdCMV-tk적HUVEC세포화HepG2세포기존활솔분별하강지(17.56±2.48)%화(23.15±5.72)%(P＞0.05).결론 KDR계동자개도적HSV-tk구유특이성살상혈관내피세포적작용.
