食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2007年
7期
276-279
,共4页
汪靖超%孙东平%杜桂彩%郭道森%李荣贵
汪靖超%孫東平%杜桂綵%郭道森%李榮貴
왕정초%손동평%두계채%곽도삼%리영귀
噬夏孢欧文氏菌%crtE%GGPP合成酶%表达%纯化
噬夏孢歐文氏菌%crtE%GGPP閤成酶%錶達%純化
서하포구문씨균%crtE%GGPP합성매%표체%순화
噬夏孢欧文氏菌基因crtE编码GGPP合成酶.通过PCR扩增获得crtE基因,克隆进表达载体,构建表达质粒pET-15bcrtE.重组质粒转化E.coli BL21(DE3),构建工程菌;重组GGPP合成酶在大肠杆菌中实现了高效表达,表达量占菌体总蛋白的42%.重组蛋白以包含体形式存在,包含体经洗涤、尿素溶解、复性并经镍离子亲和层析树脂纯化,得到了电泳纯的重组噬夏孢欧文氏菌GGPP合成酶,带有His-tag的该蛋白分子量为34kDa,pI值为6.3.
噬夏孢歐文氏菌基因crtE編碼GGPP閤成酶.通過PCR擴增穫得crtE基因,剋隆進錶達載體,構建錶達質粒pET-15bcrtE.重組質粒轉化E.coli BL21(DE3),構建工程菌;重組GGPP閤成酶在大腸桿菌中實現瞭高效錶達,錶達量佔菌體總蛋白的42%.重組蛋白以包含體形式存在,包含體經洗滌、尿素溶解、複性併經鎳離子親和層析樹脂純化,得到瞭電泳純的重組噬夏孢歐文氏菌GGPP閤成酶,帶有His-tag的該蛋白分子量為34kDa,pI值為6.3.
서하포구문씨균기인crtE편마GGPP합성매.통과PCR확증획득crtE기인,극륭진표체재체,구건표체질립pET-15bcrtE.중조질립전화E.coli BL21(DE3),구건공정균;중조GGPP합성매재대장간균중실현료고효표체,표체량점균체총단백적42%.중조단백이포함체형식존재,포함체경세조、뇨소용해、복성병경얼리자친화층석수지순화,득도료전영순적중조서하포구문씨균GGPP합성매,대유His-tag적해단백분자량위34kDa,pI치위6.3.
