中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2008年
10期
1351-1355
,共5页
徐建敏%张红刚%费晓庆%鞠熀先%郑杰%刘胜利
徐建敏%張紅剛%費曉慶%鞠熀先%鄭傑%劉勝利
서건민%장홍강%비효경%국엽선%정걸%류성리
核苷转运载体%RNA干扰%5-氟尿嘧啶%胰腺癌细胞株%毛细管区带电泳
覈苷轉運載體%RNA榦擾%5-氟尿嘧啶%胰腺癌細胞株%毛細管區帶電泳
핵감전운재체%RNA간우%5-불뇨밀정%이선암세포주%모세관구대전영
目的 明确hENT1在5-FU跨膜转运和返流中的作用,以及返流对5-FU在细胞内浓度的影响.方法 将能特异性下调hENT1的重组及对照质粒用脂质体法转染到SW1990细胞内,RT-PCR检测hENT1 mRNA表达情况.分别培养SW1990、pSilence-hENT1SiSW1990、pSilence-Control SW1990细胞,3组细胞均置于含5-FU 100 mg·L-1的DMEM中温浴.各组取等量细胞刮取液两份,一份用毛细管区带电泳测定5-FU含量、另一份作平行样本测定蛋白含量,最后计算细胞内5-FU浓度.结果 pSilence-hENT1SiSW1990细胞hENT1 mRNA表达水平下调0.5.SW1990组用5-FU温浴后,细胞内5-FU浓度在早期迅速升高,120 min后处于平台期.pSilence-hENT1Control-SW1990组与SW1990组相比无差异(P>0.05).而pSilence-hENT1SiSW1990细胞内5-FU浓度早期上升较慢,但随着时间延长,浓度逐渐升高,120 min后细胞内浓度稳定,高于对照组中浓度(P<0.05).结论 干扰hENT1表达可以提高5-FU在SW1990细胞内浓度.hENT-1是SW1990细胞向外返流5-FU的主要通道.
目的 明確hENT1在5-FU跨膜轉運和返流中的作用,以及返流對5-FU在細胞內濃度的影響.方法 將能特異性下調hENT1的重組及對照質粒用脂質體法轉染到SW1990細胞內,RT-PCR檢測hENT1 mRNA錶達情況.分彆培養SW1990、pSilence-hENT1SiSW1990、pSilence-Control SW1990細胞,3組細胞均置于含5-FU 100 mg·L-1的DMEM中溫浴.各組取等量細胞颳取液兩份,一份用毛細管區帶電泳測定5-FU含量、另一份作平行樣本測定蛋白含量,最後計算細胞內5-FU濃度.結果 pSilence-hENT1SiSW1990細胞hENT1 mRNA錶達水平下調0.5.SW1990組用5-FU溫浴後,細胞內5-FU濃度在早期迅速升高,120 min後處于平檯期.pSilence-hENT1Control-SW1990組與SW1990組相比無差異(P>0.05).而pSilence-hENT1SiSW1990細胞內5-FU濃度早期上升較慢,但隨著時間延長,濃度逐漸升高,120 min後細胞內濃度穩定,高于對照組中濃度(P<0.05).結論 榦擾hENT1錶達可以提高5-FU在SW1990細胞內濃度.hENT-1是SW1990細胞嚮外返流5-FU的主要通道.
목적 명학hENT1재5-FU과막전운화반류중적작용,이급반류대5-FU재세포내농도적영향.방법 장능특이성하조hENT1적중조급대조질립용지질체법전염도SW1990세포내,RT-PCR검측hENT1 mRNA표체정황.분별배양SW1990、pSilence-hENT1SiSW1990、pSilence-Control SW1990세포,3조세포균치우함5-FU 100 mg·L-1적DMEM중온욕.각조취등량세포괄취액량빈,일빈용모세관구대전영측정5-FU함량、령일빈작평행양본측정단백함량,최후계산세포내5-FU농도.결과 pSilence-hENT1SiSW1990세포hENT1 mRNA표체수평하조0.5.SW1990조용5-FU온욕후,세포내5-FU농도재조기신속승고,120 min후처우평태기.pSilence-hENT1Control-SW1990조여SW1990조상비무차이(P>0.05).이pSilence-hENT1SiSW1990세포내5-FU농도조기상승교만,단수착시간연장,농도축점승고,120 min후세포내농도은정,고우대조조중농도(P<0.05).결론 간우hENT1표체가이제고5-FU재SW1990세포내농도.hENT-1시SW1990세포향외반류5-FU적주요통도.
