石河子大学学报（自然科学版）
石河子大學學報（自然科學版）
석하자대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHIHEZI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2009年
6期
666-670
,共5页
郝凤霞%胡文革%康壮丽%付伟超%陈创夫
郝鳳霞%鬍文革%康壯麗%付偉超%陳創伕
학봉하%호문혁%강장려%부위초%진창부
抗冻蛋白%亲和纯化%抗冻保护活性%菌落计数
抗凍蛋白%親和純化%抗凍保護活性%菌落計數
항동단백%친화순화%항동보호활성%균락계수
为了通过细菌低温保护实验测定鱼源Ⅲ型抗冻蛋白(AFPⅢ)对大肠杆菌的低温保护效果,利用前期构建的原核表达质粒pET32a(+)-AFPⅢ转化大肠杆菌,目的蛋白以融合his标签的形式在大肠杆菌中表达,经N1柱亲和层析得到较高纯度的AFPⅢ-his融合蛋白.细菌抗冻实验的结果表明,外加一定浓度范围内的纯化的AFPⅢ融合蛋白对细菌有明显保护作用,但是抗冻蛋白的浓度对细菌的保护力不成一致的线性关系.鱼源Ⅲ型抗冻蛋白的浓度在50μg/mL时抗冻效果最好,并且随着温度的下降,抗冻蛋白对细菌的保护能力与Glycerol对细菌的保护能力的差距逐渐减少,在-80℃时基本可以代替甘油用于菌种保存.
為瞭通過細菌低溫保護實驗測定魚源Ⅲ型抗凍蛋白(AFPⅢ)對大腸桿菌的低溫保護效果,利用前期構建的原覈錶達質粒pET32a(+)-AFPⅢ轉化大腸桿菌,目的蛋白以融閤his標籤的形式在大腸桿菌中錶達,經N1柱親和層析得到較高純度的AFPⅢ-his融閤蛋白.細菌抗凍實驗的結果錶明,外加一定濃度範圍內的純化的AFPⅢ融閤蛋白對細菌有明顯保護作用,但是抗凍蛋白的濃度對細菌的保護力不成一緻的線性關繫.魚源Ⅲ型抗凍蛋白的濃度在50μg/mL時抗凍效果最好,併且隨著溫度的下降,抗凍蛋白對細菌的保護能力與Glycerol對細菌的保護能力的差距逐漸減少,在-80℃時基本可以代替甘油用于菌種保存.
위료통과세균저온보호실험측정어원Ⅲ형항동단백(AFPⅢ)대대장간균적저온보호효과,이용전기구건적원핵표체질립pET32a(+)-AFPⅢ전화대장간균,목적단백이융합his표첨적형식재대장간균중표체,경N1주친화층석득도교고순도적AFPⅢ-his융합단백.세균항동실험적결과표명,외가일정농도범위내적순화적AFPⅢ융합단백대세균유명현보호작용,단시항동단백적농도대세균적보호력불성일치적선성관계.어원Ⅲ형항동단백적농도재50μg/mL시항동효과최호,병차수착온도적하강,항동단백대세균적보호능력여Glycerol대세균적보호능력적차거축점감소,재-80℃시기본가이대체감유용우균충보존.
