河南农业大学学报
河南農業大學學報
하남농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS HENANENSIS
2011年
1期
91-96
,共6页
邓久虎%许兰菊%杨永珍%张丹鹤%苗银萍%李炜
鄧久虎%許蘭菊%楊永珍%張丹鶴%苗銀萍%李煒
산구호%허란국%양영진%장단학%묘은평%리위
鸡源鲍氏志贺氏菌%LPS%抗体%间接ELISA
鷄源鮑氏誌賀氏菌%LPS%抗體%間接ELISA
계원포씨지하씨균%LPS%항체%간접ELISA
以鸡源鲍氏志贺氏茵菌体提取的脂多糖(LPS)成分作为检测抗原,以辣根过氧化物酶标记的免抗鸡IgG抗体为第二抗体,以TMB为显色剂,成功建立了检测鸡源鲍氏志贺氏茵抗体的间接ELISA方法.通过对间接ELISA反应条件的一系列研究,确定了各种最适工作条件:鸡源鲍氏志贺氏茵LPS抗原最适包被质量浓度为5mg·L-1,最适包被条件为4 ℃过夜;待检血清的最佳稀释度为1∶160,与包被抗原在37 ℃作用1 h;酶标二抗的最适工作浓度为1∶2 000,血清与酶标二抗的反应条件为37 ℃ 1 h;最适封闭条件为37 ℃作用1 h;底物最适反应条件为室温避光20 min;阴阳性临界值为0.385.经特异性试验、敏感性试验和重复性试验,表明建立的间接ELISA方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等特点.
以鷄源鮑氏誌賀氏茵菌體提取的脂多糖(LPS)成分作為檢測抗原,以辣根過氧化物酶標記的免抗鷄IgG抗體為第二抗體,以TMB為顯色劑,成功建立瞭檢測鷄源鮑氏誌賀氏茵抗體的間接ELISA方法.通過對間接ELISA反應條件的一繫列研究,確定瞭各種最適工作條件:鷄源鮑氏誌賀氏茵LPS抗原最適包被質量濃度為5mg·L-1,最適包被條件為4 ℃過夜;待檢血清的最佳稀釋度為1∶160,與包被抗原在37 ℃作用1 h;酶標二抗的最適工作濃度為1∶2 000,血清與酶標二抗的反應條件為37 ℃ 1 h;最適封閉條件為37 ℃作用1 h;底物最適反應條件為室溫避光20 min;陰暘性臨界值為0.385.經特異性試驗、敏感性試驗和重複性試驗,錶明建立的間接ELISA方法具有特異性彊、敏感性高、重複性好等特點.
이계원포씨지하씨인균체제취적지다당(LPS)성분작위검측항원,이랄근과양화물매표기적면항계IgG항체위제이항체,이TMB위현색제,성공건립료검측계원포씨지하씨인항체적간접ELISA방법.통과대간접ELISA반응조건적일계렬연구,학정료각충최괄공작조건:계원포씨지하씨인LPS항원최괄포피질량농도위5mg·L-1,최괄포피조건위4 ℃과야;대검혈청적최가희석도위1∶160,여포피항원재37 ℃작용1 h;매표이항적최괄공작농도위1∶2 000,혈청여매표이항적반응조건위37 ℃ 1 h;최괄봉폐조건위37 ℃작용1 h;저물최괄반응조건위실온피광20 min;음양성림계치위0.385.경특이성시험、민감성시험화중복성시험,표명건립적간접ELISA방법구유특이성강、민감성고、중복성호등특점.
