吉林医药学院学报
吉林醫藥學院學報
길림의약학원학보
JOURNAL OF JILIN MEDICAL COLLEGE
2011年
2期
73-76
,共4页
张亚前%李庆伟%吕莉%刘欣%王继红
張亞前%李慶偉%呂莉%劉訢%王繼紅
장아전%리경위%려리%류흔%왕계홍
七鳃鳗%人工合成序列%缺失突变体%基因克隆%蛋白表达
七鰓鰻%人工閤成序列%缺失突變體%基因剋隆%蛋白錶達
칠새만%인공합성서렬%결실돌변체%기인극륭%단백표체
目的 获得突变体Lj-113的基因重组蛋白,为其与野生型活性比较打下物质基础.方法 对日本七鳃鳗RGD缺失突变体Lj-113进行基因全序列人工合成,并以Nde I与Hind III为酶切位点构建于pET23b载体上,获得阳性基因重组质粒pET23b-Lj113.CaCl2法将重组质粒转化入大肠杆菌BL21表达菌中,对其进行终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导表达,并对表达蛋白进行组氨酸亲和层析纯化蛋白.结果 成功获得七鳃鳗RGD缺失突变体的基因重组蛋白的可溶性表达.结论 人工合成基因序列可通过分子克隆方法获得其蛋白的表达.
目的 穫得突變體Lj-113的基因重組蛋白,為其與野生型活性比較打下物質基礎.方法 對日本七鰓鰻RGD缺失突變體Lj-113進行基因全序列人工閤成,併以Nde I與Hind III為酶切位點構建于pET23b載體上,穫得暘性基因重組質粒pET23b-Lj113.CaCl2法將重組質粒轉化入大腸桿菌BL21錶達菌中,對其進行終濃度為1 mmol/L的IPTG誘導錶達,併對錶達蛋白進行組氨痠親和層析純化蛋白.結果 成功穫得七鰓鰻RGD缺失突變體的基因重組蛋白的可溶性錶達.結論 人工閤成基因序列可通過分子剋隆方法穫得其蛋白的錶達.
목적 획득돌변체Lj-113적기인중조단백,위기여야생형활성비교타하물질기출.방법 대일본칠새만RGD결실돌변체Lj-113진행기인전서렬인공합성,병이Nde I여Hind III위매절위점구건우pET23b재체상,획득양성기인중조질립pET23b-Lj113.CaCl2법장중조질립전화입대장간균BL21표체균중,대기진행종농도위1 mmol/L적IPTG유도표체,병대표체단백진행조안산친화층석순화단백.결과 성공획득칠새만RGD결실돌변체적기인중조단백적가용성표체.결론 인공합성기인서렬가통과분자극륭방법획득기단백적표체.
