CAJ | 학술논문

丙型肝炎病毒( HCV)包膜E2蛋白氨基端的高变区1(HVR1)由27个氨基酸组成,是HCV蛋白中变异频率最高的肽段.HVR1含中和抗体表位,同时对HCV细胞侵入起重要作用,其结构与功能的关系目前尚不清楚.本研究对H77株包膜蛋白基因中的HVR1进行了一系列缺失突变,然后将突变体表达质粒与假病毒包装质粒共转染人胚肾(HEK)293T细胞,用蛋白免疫印迹法检测细胞中HCV包膜E2蛋白的表达,用荧光定量聚合酶链反应检测培养上清液中的HCV假病毒(HCVpp)含量,以人肝癌细胞Huh7.5为靶细胞检测HCVpp的感染力.结果显示,缺失整个HVR1或HVR1中部分氨基酸残基对HCV包膜蛋白表达及HCVpp产量均无明显影响,但对HCVpp感染力产生不同影响.缺失第16～24位氨基酸残基导致HCVpp感染力增强,缺失第1～8位或1～12位氨基酸残基仅部分降低HCVpp感染力,缺失第13～15位和25～27位中的任意一个氨基酸残基均导致HCVpp感染力低于原型的5％.结果提示,HVR1中第13～15位和25～27位的6个氨基酸是介导HCV感染的关键氨基酸残基.
병형간염병독( HCV)포막E2단백안기단적고변구1(HVR1)유27개안기산조성,시HCV단백중변이빈솔최고적태단.HVR1함중화항체표위,동시대HCV세포침입기중요작용,기결구여공능적관계목전상불청초.본연구대H77주포막단백기인중적HVR1진행료일계렬결실돌변,연후장돌변체표체질립여가병독포장질립공전염인배신(HEK)293T세포,용단백면역인적법검측세포중HCV포막E2단백적표체,용형광정량취합매련반응검측배양상청액중적HCV가병독(HCVpp)함량,이인간암세포Huh7.5위파세포검측HCVpp적감염력.결과현시,결실정개HVR1혹HVR1중부분안기산잔기대HCV포막단백표체급HCVpp산량균무명현영향,단대HCVpp감염력산생불동영향.결실제16～24위안기산잔기도치HCVpp감염력증강,결실제1～8위혹1～12위안기산잔기부부분강저HCVpp감염력,결실제13～15위화25～27위중적임의일개안기산잔기균도치HCVpp감염력저우원형적5％.결과제시,HVR1중제13～15위화25～27위적6개안기산시개도HCV감염적관건안기산잔기.