CAJ | 학술논문

目的:探讨自噬基因Beclin 1在裸鼠体内对人肺腺癌A549细胞成瘤性的影响.方法:将重组质粒pRNAT-U6.2/Lenti-si423和pLenex-Beclin 1通过脂质体介导的方法分别转染到A549细胞中.采用实时荧光定量PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)和蛋白质印迹法分别检测转染细胞中Beclin 1 mRNA和蛋白的表达；MTT法检测转染细胞在体外的增殖能力.将过表达或沉默Beclin1基因的A549细胞株分别接种于裸鼠右侧腋部皮下,观察瘤体的生长速度和大小,并采用RFQPCR和免疫组织化学法检测瘤体组织中Beclin 1mRNA和蛋白的表达.结果:转染重组质粒pLenex-Beclin 1的A549细胞中Beclin 1 mRNA和蛋白表达量显著增加,而体外增殖能力被明显降低；转染重组质粒pRNAT-U6.2/Lenti-si423的A549细胞中Beclin 1 mRNA和蛋白表达量显著减少.过表达Beclin 1组的裸鼠皮下移植瘤生长缓慢,肿瘤体积明显缩小、质量明显减轻,移植瘤组织中Beclin 1 mRNA以及蛋白的相对表达量增加；而Beclin 1基因沉默组的移植瘤组织中Beclin 1 mRNA及其蛋白的相对表达量降低.结论:自噬基因Beclin 1的过表达可以抑制A549细胞在裸鼠体内的生长,有望成为肿瘤治疗的一个新靶点.
목적:탐토자서기인Beclin 1재라서체내대인폐선암A549세포성류성적영향.방법:장중조질립pRNAT-U6.2/Lenti-si423화pLenex-Beclin 1통과지질체개도적방법분별전염도A549세포중.채용실시형광정량PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)화단백질인적법분별검측전염세포중Beclin 1 mRNA화단백적표체；MTT법검측전염세포재체외적증식능력.장과표체혹침묵Beclin1기인적A549세포주분별접충우라서우측액부피하,관찰류체적생장속도화대소,병채용RFQPCR화면역조직화학법검측류체조직중Beclin 1mRNA화단백적표체.결과:전염중조질립pLenex-Beclin 1적A549세포중Beclin 1 mRNA화단백표체량현저증가,이체외증식능력피명현강저；전염중조질립pRNAT-U6.2/Lenti-si423적A549세포중Beclin 1 mRNA화단백표체량현저감소.과표체Beclin 1조적라서피하이식류생장완만,종류체적명현축소、질량명현감경,이식류조직중Beclin 1 mRNA이급단백적상대표체량증가；이Beclin 1기인침묵조적이식류조직중Beclin 1 mRNA급기단백적상대표체량강저.결론:자서기인Beclin 1적과표체가이억제A549세포재라서체내적생장,유망성위종류치료적일개신파점.