中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2012年
9期
1239-1243
,共5页
刘丹%尹东%廖章萍%孙惦%许旻%何明
劉丹%尹東%廖章萍%孫惦%許旻%何明
류단%윤동%료장평%손점%허민%하명
缺氧/复氧损伤%心肌保护%LPS%凋亡%14-3-3γ%p38MAPK通路
缺氧/複氧損傷%心肌保護%LPS%凋亡%14-3-3γ%p38MAPK通路
결양/복양손상%심기보호%LPS%조망%14-3-3γ%p38MAPK통로
目的 研究p38MAPK/14-3-3γ通路在LPS预处理对抗缺氧/复氧(A/R)损伤中的作用.方法 采用原代培养乳鼠心肌细胞,建立A/R损伤模型及APC、LPS预处理保护模型.实验结束后测定p38MAPK 磷酸化蛋白表达及14-3-3γ蛋白表达,同时检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH) 活性、四唑盐(MTT)比色试验测定细胞存活率、TUNEL法检测细胞凋亡、线粒体肿胀实验检测线粒体通透性转换孔(mPTP)开放、流式细胞仪检测线粒体膜电位.结果 LPS预处理对随后心肌A/R损伤有类似APC的保护作用,同时伴随p38 MAPK的磷酸化水平升高和14-3-3γ蛋白表达升高;给予SB203850特异性阻断p38MAPK通路,则14-3-3γ蛋白表达明显下调,并且心肌细胞LDH值升高,细胞存活率下降,心肌细胞的凋亡指数升高,mPTP开放加剧,线粒体膜电位降低.结论 LPS预处理对心肌细胞A/R损伤有保护作用,其机制可能是通过激活p38 MAPK,上调14-3-3γ的表达实现.
目的 研究p38MAPK/14-3-3γ通路在LPS預處理對抗缺氧/複氧(A/R)損傷中的作用.方法 採用原代培養乳鼠心肌細胞,建立A/R損傷模型及APC、LPS預處理保護模型.實驗結束後測定p38MAPK 燐痠化蛋白錶達及14-3-3γ蛋白錶達,同時檢測培養液中乳痠脫氫酶(LDH) 活性、四唑鹽(MTT)比色試驗測定細胞存活率、TUNEL法檢測細胞凋亡、線粒體腫脹實驗檢測線粒體通透性轉換孔(mPTP)開放、流式細胞儀檢測線粒體膜電位.結果 LPS預處理對隨後心肌A/R損傷有類似APC的保護作用,同時伴隨p38 MAPK的燐痠化水平升高和14-3-3γ蛋白錶達升高;給予SB203850特異性阻斷p38MAPK通路,則14-3-3γ蛋白錶達明顯下調,併且心肌細胞LDH值升高,細胞存活率下降,心肌細胞的凋亡指數升高,mPTP開放加劇,線粒體膜電位降低.結論 LPS預處理對心肌細胞A/R損傷有保護作用,其機製可能是通過激活p38 MAPK,上調14-3-3γ的錶達實現.
목적 연구p38MAPK/14-3-3γ통로재LPS예처리대항결양/복양(A/R)손상중적작용.방법 채용원대배양유서심기세포,건립A/R손상모형급APC、LPS예처리보호모형.실험결속후측정p38MAPK 린산화단백표체급14-3-3γ단백표체,동시검측배양액중유산탈경매(LDH) 활성、사서염(MTT)비색시험측정세포존활솔、TUNEL법검측세포조망、선립체종창실험검측선립체통투성전환공(mPTP)개방、류식세포의검측선립체막전위.결과 LPS예처리대수후심기A/R손상유유사APC적보호작용,동시반수p38 MAPK적린산화수평승고화14-3-3γ단백표체승고;급여SB203850특이성조단p38MAPK통로,칙14-3-3γ단백표체명현하조,병차심기세포LDH치승고,세포존활솔하강,심기세포적조망지수승고,mPTP개방가극,선립체막전위강저.결론 LPS예처리대심기세포A/R손상유보호작용,기궤제가능시통과격활p38 MAPK,상조14-3-3γ적표체실현.
