食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2007年
1期
171-175
,共5页
葛萃萃%钟青萍%张旺%欧阳鑫
葛萃萃%鐘青萍%張旺%歐暘鑫
갈췌췌%종청평%장왕%구양흠
大肠杆菌O157:H7%双抗夹心ELISA%检测
大腸桿菌O157:H7%雙抗夾心ELISA%檢測
대장간균O157:H7%쌍항협심ELISA%검측
研究获得纯化抗大肠杆菌O157:H7 IgY抗体,经检测10mg/ml纯化IgY抗体的效价为1:320;以大肠杆菌O157:H7免疫新西兰大耳白兔,获得兔抗大肠杆菌O157:H7 IgG抗体,效价达1:25600.以兔抗大肠杆菌O157:H7IgG抗体稀释3200倍作为捕获抗体,抗大肠杆菌O157:H7 IgY抗体为检测抗体建立双抗夹心ELISA方法检测大肠杆菌O157:H7,正交试验分析表明,捕获抗体于37℃包被2h、不封闭、抗原与捕获抗体于37℃结合2h、检测抗体浓度为0.25mg/ml、与抗原于37℃结合1h为最优反应条件.该方法对纯培养菌液检出限为105CFU/ml,具有良好的敏感性及特异性.染菌样品经在EC增菌液中选择性培养后进行双抗夹心ELISA检测,接种量为0.1～1CFU/g(ml)的样品在培养12h后可检出阳性反应,1～10CFU/g(ml)的样品在培养8h后可检出阳性反应.
研究穫得純化抗大腸桿菌O157:H7 IgY抗體,經檢測10mg/ml純化IgY抗體的效價為1:320;以大腸桿菌O157:H7免疫新西蘭大耳白兔,穫得兔抗大腸桿菌O157:H7 IgG抗體,效價達1:25600.以兔抗大腸桿菌O157:H7IgG抗體稀釋3200倍作為捕穫抗體,抗大腸桿菌O157:H7 IgY抗體為檢測抗體建立雙抗夾心ELISA方法檢測大腸桿菌O157:H7,正交試驗分析錶明,捕穫抗體于37℃包被2h、不封閉、抗原與捕穫抗體于37℃結閤2h、檢測抗體濃度為0.25mg/ml、與抗原于37℃結閤1h為最優反應條件.該方法對純培養菌液檢齣限為105CFU/ml,具有良好的敏感性及特異性.染菌樣品經在EC增菌液中選擇性培養後進行雙抗夾心ELISA檢測,接種量為0.1～1CFU/g(ml)的樣品在培養12h後可檢齣暘性反應,1～10CFU/g(ml)的樣品在培養8h後可檢齣暘性反應.
연구획득순화항대장간균O157:H7 IgY항체,경검측10mg/ml순화IgY항체적효개위1:320;이대장간균O157:H7면역신서란대이백토,획득토항대장간균O157:H7 IgG항체,효개체1:25600.이토항대장간균O157:H7IgG항체희석3200배작위포획항체,항대장간균O157:H7 IgY항체위검측항체건립쌍항협심ELISA방법검측대장간균O157:H7,정교시험분석표명,포획항체우37℃포피2h、불봉폐、항원여포획항체우37℃결합2h、검측항체농도위0.25mg/ml、여항원우37℃결합1h위최우반응조건.해방법대순배양균액검출한위105CFU/ml,구유량호적민감성급특이성.염균양품경재EC증균액중선택성배양후진행쌍항협심ELISA검측,접충량위0.1～1CFU/g(ml)적양품재배양12h후가검출양성반응,1～10CFU/g(ml)적양품재배양8h후가검출양성반응.
