中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2009年
9期
47-50
,共4页
咸洋%夏阳%张金文%庞彩红%李丽%毛秀红
鹹洋%夏暘%張金文%龐綵紅%李麗%毛秀紅
함양%하양%장금문%방채홍%리려%모수홍
beta%BADH%酶切%PCR
beta%BADH%酶切%PCR
beta%BADH%매절%PCR
将载体pCAMBIA2300-35s-OCS进行改造,增加了酶切位点Sac Ⅰ,之后,PCR扩增编码胆碱脱氢酶(CDH)的基因并用Sma Ⅰ和Xba Ⅰ将其与改造后的pCAMBIA2300-35s-OCS连接,得到单价植物表达栽体p2300-gz-betA.再通过Sal Ⅰ、Hind Ⅲ、Sac Ⅰ等酶切位点将编码甜菜碱醛脱氧酶(BADH)的基因及其启动子和终止序列连接到栽体p2300-gz-betA上,最终得到pCAMBIA2300-betA-BADH双价植物表达载体,并将其导入根癌农杆菌GV3101和LBA4404.betA和BADH是编码甜菜碱合成途径的两个关键酶的基因(CDH和BADH),也是近年来研究较多的耐盐基因,其双价植物表达栽体应用于遗传转化后,有望进一步提高转基因植物的耐盐性.
將載體pCAMBIA2300-35s-OCS進行改造,增加瞭酶切位點Sac Ⅰ,之後,PCR擴增編碼膽堿脫氫酶(CDH)的基因併用Sma Ⅰ和Xba Ⅰ將其與改造後的pCAMBIA2300-35s-OCS連接,得到單價植物錶達栽體p2300-gz-betA.再通過Sal Ⅰ、Hind Ⅲ、Sac Ⅰ等酶切位點將編碼甜菜堿醛脫氧酶(BADH)的基因及其啟動子和終止序列連接到栽體p2300-gz-betA上,最終得到pCAMBIA2300-betA-BADH雙價植物錶達載體,併將其導入根癌農桿菌GV3101和LBA4404.betA和BADH是編碼甜菜堿閤成途徑的兩箇關鍵酶的基因(CDH和BADH),也是近年來研究較多的耐鹽基因,其雙價植物錶達栽體應用于遺傳轉化後,有望進一步提高轉基因植物的耐鹽性.
장재체pCAMBIA2300-35s-OCS진행개조,증가료매절위점Sac Ⅰ,지후,PCR확증편마담감탈경매(CDH)적기인병용Sma Ⅰ화Xba Ⅰ장기여개조후적pCAMBIA2300-35s-OCS련접,득도단개식물표체재체p2300-gz-betA.재통과Sal Ⅰ、Hind Ⅲ、Sac Ⅰ등매절위점장편마첨채감철탈양매(BADH)적기인급기계동자화종지서렬련접도재체p2300-gz-betA상,최종득도pCAMBIA2300-betA-BADH쌍개식물표체재체,병장기도입근암농간균GV3101화LBA4404.betA화BADH시편마첨채감합성도경적량개관건매적기인(CDH화BADH),야시근년래연구교다적내염기인,기쌍개식물표체재체응용우유전전화후,유망진일보제고전기인식물적내염성.
