中南林业科技大学学报
中南林業科技大學學報
중남임업과기대학학보
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY OF FORESTRY & TECHNOLOGY
2010年
2期
70-74
,共5页
原勤勤%文亚峰%何钢%刘儒
原勤勤%文亞峰%何鋼%劉儒
원근근%문아봉%하강%류유
枣树%分子标记%ISSR-PCR%反应体系%正交设计
棘樹%分子標記%ISSR-PCR%反應體繫%正交設計
조수%분자표기%ISSR-PCR%반응체계%정교설계
Jujube%molecular marker%ISSR-PCR%reaction system%orthogonal design
采用正交设计的方法对枣ISSR-PCR反应体系的5因素(Taq酶、Mg~(2+)、模板DNA,dNTPs、引物的浓度)在4水平上进行优化试验,PCR结果用DPS数据处理软件分析.实验结果表明:各因素的不同水平对PCR反应结果都有显著的影响.其中Mg~(2+)影响最大;筛选出了各反应因素的最佳水平,建立枣ISSR-PCR的最佳反应体系(25 μL)为:Taq酶1.0 U、Mg~(2+)1.0 mmol/L模板DNA 1.0 μL、dNTPs 0.25 mmol/L、引物0.3μmol/L.
採用正交設計的方法對棘ISSR-PCR反應體繫的5因素(Taq酶、Mg~(2+)、模闆DNA,dNTPs、引物的濃度)在4水平上進行優化試驗,PCR結果用DPS數據處理軟件分析.實驗結果錶明:各因素的不同水平對PCR反應結果都有顯著的影響.其中Mg~(2+)影響最大;篩選齣瞭各反應因素的最佳水平,建立棘ISSR-PCR的最佳反應體繫(25 μL)為:Taq酶1.0 U、Mg~(2+)1.0 mmol/L模闆DNA 1.0 μL、dNTPs 0.25 mmol/L、引物0.3μmol/L.
채용정교설계적방법대조ISSR-PCR반응체계적5인소(Taq매、Mg~(2+)、모판DNA,dNTPs、인물적농도)재4수평상진행우화시험,PCR결과용DPS수거처리연건분석.실험결과표명:각인소적불동수평대PCR반응결과도유현저적영향.기중Mg~(2+)영향최대;사선출료각반응인소적최가수평,건립조ISSR-PCR적최가반응체계(25 μL)위:Taq매1.0 U、Mg~(2+)1.0 mmol/L모판DNA 1.0 μL、dNTPs 0.25 mmol/L、인물0.3μmol/L.
Using the orthogonal design to optimize ISSR-PCR amplification system on jujube in four levels of five factors (Taq DNA polymerase, Mg~(2+), DNA template, dNTP, and primer) respectively. PCR result showed that each factor in different levels has significant effect on the result of PCR, the most remarkable factor was the quantity of Taq DNA polymerase. The optimum level of ISSR-PCR system for jujube was established. The total reaction system was 25 μL and contained 1.0U Taq DNA polymerase, 1.0 mmol/L Mg~(2+), 1.0 μL DNA template, 0.25 mmol/L dNTPs and 0.3/zmol/L Primer.
