CAJ | 학술논문

[目的]为开展植物耐盐基因工程提供候选基因.[方法]研究以新疆耐盐植物藜为材料,利用同源克隆技术从藜中克隆到BADH基因,并通过RT-PCR方法对其在不同盐胁迫下的表达进行了初步分析,随后将该基因构建至高效植物表达载体pCN2300上.[结果](1)经测序分析并与藜科其他植物进行同源性比对显示,得到的序列为藜的BADH基因,开放阅读框长度为1 503 bp,编码500个氨基酸;(2)以BADH基因核心序列设计引物对此基因在盐胁迫下的表达进行了RT-RCR分析,发现其本底表达量较高,以100 mmol/L NaCl处理2、5、12和24 h后其表达量没有明显增加趋势,而以50 mmol/L- NaCl或KCl长期胁迫后其表达量则比对照和100 mmol/L时的表达量高;(3)经双酶切鉴定,已成功将CaBADH基因构建到植物表达载体pCN2300,得到重组质粒pCN2300-CaBADH.[结论]研究为进一步从生理和分子水平阐明藜的耐盐机制提供了一定参考.并为通过转基因技术获得耐盐作物新品种打下基础.
[목적]위개전식물내염기인공정제공후선기인.[방법]연구이신강내염식물려위재료,이용동원극륭기술종려중극륭도BADH기인,병통과RT-PCR방법대기재불동염협박하적표체진행료초보분석,수후장해기인구건지고효식물표체재체pCN2300상.[결과](1)경측서분석병여려과기타식물진행동원성비대현시,득도적서렬위려적BADH기인,개방열독광장도위1 503 bp,편마500개안기산;(2)이BADH기인핵심서렬설계인물대차기인재염협박하적표체진행료RT-RCR분석,발현기본저표체량교고,이100 mmol/L NaCl처리2、5、12화24 h후기표체량몰유명현증가추세,이이50 mmol/L- NaCl혹KCl장기협박후기표체량칙비대조화100 mmol/L시적표체량고;(3)경쌍매절감정,이성공장CaBADH기인구건도식물표체재체pCN2300,득도중조질립pCN2300-CaBADH.[결론]연구위진일보종생리화분자수평천명려적내염궤제제공료일정삼고.병위통과전기인기술획득내염작물신품충타하기출.