军事医学
軍事醫學
군사의학
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2011年
4期
245-248
,共4页
董雯%胡美茹%高明%郭宁%宋伦
董雯%鬍美茹%高明%郭寧%宋倫
동문%호미여%고명%곽저%송륜
p53%乙酰化作用%紫外线%细胞凋亡
p53%乙酰化作用%紫外線%細胞凋亡
p53%을선화작용%자외선%세포조망
目的 探讨p53 K370位乙酰化修饰反应在紫外线B(UVB)诱导p53活化及细胞凋亡反应中的作用.方法 体外培养野生型和p53基因缺陷型小鼠胚胎成纤维细胞(wt-MEFs和p53-/-MEFs).以UVB为刺激源,双荧光素酶报告基因法分析wt-MEFs细胞中p53的转录诱导活化情况;Western印迹检测UVB诱导p53在K370位发生乙酰化修饰反应及p53总蛋白表达情况;构建p53点突变体K370R并在p53-/-MEFs细胞中比较UVB诱导wt-p53和p53 K370R的转录活化情况及野生型和突变体蛋白介导细胞凋亡反应的差异.结果 UVB刺激wt-MEFs细胞后p53转录激活活性呈剂量和时间依赖性明显上调;同样条件下UVB能够有效诱导p53在K370位发生乙酰化修饰反应;p53 K370位突变后并不影响UVB刺激作用下p53的蛋白质稳定性,但其转录激活活性显著下降;同时K370位突变后能够有效抑制UVB诱导的细胞凋亡反应.结论 p53 K370位乙酰化修饰反应在UVB诱导的p53活化及细胞凋亡反应中具有重要作用.
目的 探討p53 K370位乙酰化脩飾反應在紫外線B(UVB)誘導p53活化及細胞凋亡反應中的作用.方法 體外培養野生型和p53基因缺陷型小鼠胚胎成纖維細胞(wt-MEFs和p53-/-MEFs).以UVB為刺激源,雙熒光素酶報告基因法分析wt-MEFs細胞中p53的轉錄誘導活化情況;Western印跡檢測UVB誘導p53在K370位髮生乙酰化脩飾反應及p53總蛋白錶達情況;構建p53點突變體K370R併在p53-/-MEFs細胞中比較UVB誘導wt-p53和p53 K370R的轉錄活化情況及野生型和突變體蛋白介導細胞凋亡反應的差異.結果 UVB刺激wt-MEFs細胞後p53轉錄激活活性呈劑量和時間依賴性明顯上調;同樣條件下UVB能夠有效誘導p53在K370位髮生乙酰化脩飾反應;p53 K370位突變後併不影響UVB刺激作用下p53的蛋白質穩定性,但其轉錄激活活性顯著下降;同時K370位突變後能夠有效抑製UVB誘導的細胞凋亡反應.結論 p53 K370位乙酰化脩飾反應在UVB誘導的p53活化及細胞凋亡反應中具有重要作用.
목적 탐토p53 K370위을선화수식반응재자외선B(UVB)유도p53활화급세포조망반응중적작용.방법 체외배양야생형화p53기인결함형소서배태성섬유세포(wt-MEFs화p53-/-MEFs).이UVB위자격원,쌍형광소매보고기인법분석wt-MEFs세포중p53적전록유도활화정황;Western인적검측UVB유도p53재K370위발생을선화수식반응급p53총단백표체정황;구건p53점돌변체K370R병재p53-/-MEFs세포중비교UVB유도wt-p53화p53 K370R적전록활화정황급야생형화돌변체단백개도세포조망반응적차이.결과 UVB자격wt-MEFs세포후p53전록격활활성정제량화시간의뢰성명현상조;동양조건하UVB능구유효유도p53재K370위발생을선화수식반응;p53 K370위돌변후병불영향UVB자격작용하p53적단백질은정성,단기전록격활활성현저하강;동시K370위돌변후능구유효억제UVB유도적세포조망반응.결론 p53 K370위을선화수식반응재UVB유도적p53활화급세포조망반응중구유중요작용.