CAJ | 학술논문

本研究旨在探讨脐血(cord blood,CB)NK细胞的杀伤功能及细胞因子IL-2和IL-15对NK细胞杀伤K562/Jurkat细胞活性的影响.采用autoMACS及CD3阴选后CD56阳选两步免疫磁珠分选法从脐血单个核细胞纯化NK细胞,分选后NK细胞用流式细胞仪测定纯度,通过EL-2及IL-2和IL-15两种细胞因子组合培养3天,用LDH释放法检测培养前后脐血NK细胞对白血病细胞株K562和Jurkat的细胞毒活性(效靶比10:1),并记录不同细胞因子培养体系条件下NK细胞的生长状况.结果表明,CB-MNC中CD3-CD56+细胞含量为(14.88±9.2)%,分选后CD3-CD56+细胞含量为(92.39±0.8)%;培养3天后,EL-2组NK细胞形成集落数为148.60±13.0,IL-2复合IL-15组NK细胞形成集落数为831.80±23.0,两者比较,有显著性差异;以K562为靶细胞时,新鲜纯化CB-NK的杀伤活性为(27.76±8.8)%,IL-2组杀伤活性为(61.9±9.1)%,IL-2复合IL-15组杀伤活性为(87.62±3.7)%,差别有统计学意义;以Jurkat为靶细胞时,新鲜纯化CB-NK细胞的杀伤活性为(29.32±2.5)%,EL-2组杀伤活性为(69.43±4.4)%,IL-2复合IL-15组杀伤活性为(92.95±3.2)%,差别有统计学意义.结论:脐血新鲜纯化NK细胞对K562、Jurkat细胞有一定的杀伤作用,但自发细胞毒活性较低,IL-2/IL-15刺激后杀伤活性显著提高,IL-15复合IL-2对促进脐血NK细胞的生长和提高其细胞毒活性明显优于单用IL-2.
본연구지재탐토제혈(cord blood,CB)NK세포적살상공능급세포인자IL-2화IL-15대NK세포살상K562/Jurkat세포활성적영향.채용autoMACS급CD3음선후CD56양선량보면역자주분선법종제혈단개핵세포순화NK세포,분선후NK세포용류식세포의측정순도,통과EL-2급IL-2화IL-15량충세포인자조합배양3천,용LDH석방법검측배양전후제혈NK세포대백혈병세포주K562화Jurkat적세포독활성(효파비10:1),병기록불동세포인자배양체계조건하NK세포적생장상황.결과표명,CB-MNC중CD3-CD56+세포함량위(14.88±9.2)%,분선후CD3-CD56+세포함량위(92.39±0.8)%;배양3천후,EL-2조NK세포형성집락수위148.60±13.0,IL-2복합IL-15조NK세포형성집락수위831.80±23.0,량자비교,유현저성차이;이K562위파세포시,신선순화CB-NK적살상활성위(27.76±8.8)%,IL-2조살상활성위(61.9±9.1)%,IL-2복합IL-15조살상활성위(87.62±3.7)%,차별유통계학의의;이Jurkat위파세포시,신선순화CB-NK세포적살상활성위(29.32±2.5)%,EL-2조살상활성위(69.43±4.4)%,IL-2복합IL-15조살상활성위(92.95±3.2)%,차별유통계학의의.결론:제혈신선순화NK세포대K562、Jurkat세포유일정적살상작용,단자발세포독활성교저,IL-2/IL-15자격후살상활성현저제고,IL-15복합IL-2대촉진제혈NK세포적생장화제고기세포독활성명현우우단용IL-2.