中国临床康复
中國臨床康複
중국림상강복
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATION
2004年
8期
1464-1466
,共3页
李建华%黄建荣%樊雪萍%康奕飞%许继德%涂永生
李建華%黃建榮%樊雪萍%康奕飛%許繼德%塗永生
리건화%황건영%번설평%강혁비%허계덕%도영생
生物医学工程%干细胞%胰岛素样生长因子 I
生物醫學工程%榦細胞%胰島素樣生長因子 I
생물의학공정%간세포%이도소양생장인자 I
目的:建立人胚骨髓间充质干细胞(MSCs)分离及培养的方法, 探讨胰岛素样生长因子-I(IGF-I)对 MSCs增殖的影响.方法 :通过密度梯度离心,贴壁法分离培养人胚 MSCs,取第 4代 MSCs,应用流式细胞术测定细胞周期和 CD44、 CD34、 CD45表达.采用 MTT法观察不同含量和不同作用时间的 IGF-I对 MSCs增殖的影响.结果 :体外培养的 MSCs呈现成纤维细胞形态,流式细胞仪检测结果显示, MSCs阳性表达 CD44,阴性表达 CD34, CD45.细胞周期分析显示 IGF-I使 S+ G2+ M 期细胞数增加,占细胞总数(29.9± 2.3)%(t=10.4, P< 0.01).1 μ g / L IGF-I促 MSCs增殖作用不明显, 10 μ g / L IGF-I即可促 MSCs增殖, IGF-I含量为 100 μ g / L时,其促增殖作用达最大值,吸光度为 2.95.而当 IGF-I含量大于 100 μ g / L时,促细胞增殖作用反而下降;时效关系显示, IGF-I第 1天发挥促增殖作用,第 5天促增殖作用达高峰,维持时间可达 7 d.结论 :外源性 IGF-I能促进 MSCs增殖,为实现 MSCs体外快速扩增提供适宜的条件.
目的:建立人胚骨髓間充質榦細胞(MSCs)分離及培養的方法, 探討胰島素樣生長因子-I(IGF-I)對 MSCs增殖的影響.方法 :通過密度梯度離心,貼壁法分離培養人胚 MSCs,取第 4代 MSCs,應用流式細胞術測定細胞週期和 CD44、 CD34、 CD45錶達.採用 MTT法觀察不同含量和不同作用時間的 IGF-I對 MSCs增殖的影響.結果 :體外培養的 MSCs呈現成纖維細胞形態,流式細胞儀檢測結果顯示, MSCs暘性錶達 CD44,陰性錶達 CD34, CD45.細胞週期分析顯示 IGF-I使 S+ G2+ M 期細胞數增加,佔細胞總數(29.9± 2.3)%(t=10.4, P< 0.01).1 μ g / L IGF-I促 MSCs增殖作用不明顯, 10 μ g / L IGF-I即可促 MSCs增殖, IGF-I含量為 100 μ g / L時,其促增殖作用達最大值,吸光度為 2.95.而噹 IGF-I含量大于 100 μ g / L時,促細胞增殖作用反而下降;時效關繫顯示, IGF-I第 1天髮揮促增殖作用,第 5天促增殖作用達高峰,維持時間可達 7 d.結論 :外源性 IGF-I能促進 MSCs增殖,為實現 MSCs體外快速擴增提供適宜的條件.
목적:건립인배골수간충질간세포(MSCs)분리급배양적방법, 탐토이도소양생장인자-I(IGF-I)대 MSCs증식적영향.방법 :통과밀도제도리심,첩벽법분리배양인배 MSCs,취제 4대 MSCs,응용류식세포술측정세포주기화 CD44、 CD34、 CD45표체.채용 MTT법관찰불동함량화불동작용시간적 IGF-I대 MSCs증식적영향.결과 :체외배양적 MSCs정현성섬유세포형태,류식세포의검측결과현시, MSCs양성표체 CD44,음성표체 CD34, CD45.세포주기분석현시 IGF-I사 S+ G2+ M 기세포수증가,점세포총수(29.9± 2.3)%(t=10.4, P< 0.01).1 μ g / L IGF-I촉 MSCs증식작용불명현, 10 μ g / L IGF-I즉가촉 MSCs증식, IGF-I함량위 100 μ g / L시,기촉증식작용체최대치,흡광도위 2.95.이당 IGF-I함량대우 100 μ g / L시,촉세포증식작용반이하강;시효관계현시, IGF-I제 1천발휘촉증식작용,제 5천촉증식작용체고봉,유지시간가체 7 d.결론 :외원성 IGF-I능촉진 MSCs증식,위실현 MSCs체외쾌속확증제공괄의적조건.
