CAJ | 학술논문

将花生条纹病毒(Peanut strpe virus,PStV)外壳蛋白基因(cp)反向重复序列重组至植物表达载体pK7GW1WG2,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株GV3101导入本生烟(Nicotiana benthamiana).卡那霉素抗性植株5～6叶期摩擦接种PStV,通过症状观察和ELISA检测,T0代转基因烟草植株87%表现免疫,不同抗性系T1代植株的免疫比例为60%～100%,多数抗性系T2代植株免疫比例达到100%.利用PStV cp基因特异探针对转基因植株T1代进行特异小干扰性RNA(siRNA)的Northern blot检测,转基因植株都检测出不同含量的特异siRNA,而非转基因植株未检测到特异siRNA;对病毒接种前的转基因植株进行特异siRNA检测,免疫植株比感病植株特异siRNA含量高;对免疫转基因植株进行不同时期的siRNA检测,植株在接种前、接种15和50 d后的叶片中都检测到特异siRNA,同一植株不同时期siRNA含量相对稳定;各个转化系植株体内siRNA含量存在差异.实验成功地利用双链RNA(dsRNA)策略获得对PStV具有较高比例抗性的转基因烟草植株.
장화생조문병독(Peanut strpe virus,PStV)외각단백기인(cp)반향중복서렬중조지식물표체재체pK7GW1WG2,통과근암농간균(Agrobacterium tumefaciens)균주GV3101도입본생연(Nicotiana benthamiana).잡나매소항성식주5～6협기마찰접충PStV,통과증상관찰화ELISA검측,T0대전기인연초식주87%표현면역,불동항성계T1대식주적면역비례위60%～100%,다수항성계T2대식주면역비례체도100%.이용PStV cp기인특이탐침대전기인식주T1대진행특이소간우성RNA(siRNA)적Northern blot검측,전기인식주도검측출불동함량적특이siRNA,이비전기인식주미검측도특이siRNA;대병독접충전적전기인식주진행특이siRNA검측,면역식주비감병식주특이siRNA함량고;대면역전기인식주진행불동시기적siRNA검측,식주재접충전、접충15화50 d후적협편중도검측도특이siRNA,동일식주불동시기siRNA함량상대은정;각개전화계식주체내siRNA함량존재차이.실험성공지이용쌍련RNA(dsRNA)책략획득대PStV구유교고비례항성적전기인연초식주.